样品前处理方式--Gringing(研磨)及优缺点

上一篇 / 下一篇  2013-01-31 12:32:38/ 个人分类:技术文章

                                                       ----北京星越生物科技有限公司
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硏砵和杵是研磨最为人所知的工具,但仍有其它工具可用在研磨来进行样品前处理。例如谷类加工厂、咖啡研磨机以及其它实验室仪器,包括涡旋机和玻璃均质机。研磨是将样品用两个硬的表面夹在中间,两个硬的表面互相摩擦。研磨可使样品撕裂、破碎,如同剪切,但不同的是,研磨会让均质机与样品直接接触,但超声波破碎仪就不同了。
不同的研磨方式可用于湿的、干燥或冷冻的样品前处理。将相对较软的样品放在两个较硬、互相摩擦的表面,会磨损样品。利用适当的方法与研磨表面,达到破碎效果,可磨成微粒。
研磨主要的特征是摩擦力会产生热,随着时间而更加明显,但超声波破碎仪效果不明显。因此,使用研磨破坏样品必须考虑分析物对热的容忍度,否则无法达到样品前处理的要求。通常样品在研磨前会先冷冻,特别是利用液态氮,可冷却样品和均质机。这种低温研磨使样品变脆且容易断裂,但它也保留了耐热性差的被分析物或分离出来后会迅速降解的样品,如RNA。
最古老用来研磨的工具是硏砵和杵,目前在实验室最常见的研磨工具仍然是硏砵和杵,但硏砵和杵不是研磨唯一的工具。许多研究人员使用研磨珠和涡旋机用于裂解微生物,更大的硏磨珠用于组织样品。各种配置的桌上式漩涡混合器可用于微米大小的磨珠裂解细菌、酵母菌和霉菌。更大的组织样品可放于试管内,使用较大的不锈钢磨珠破坏。
涡旋机,可用于破坏细胞,但与下述其它方法相比,效果较差。一些玻璃组织均质器使用磨削力与剪切力有效的破坏培养细胞与组织。选用超声波破碎仪来进行样品前处理效果可能更好
杵与硏砵
杵与研砵仍是普遍用来做样品均质的器具。在生命科学实验室中,最常用来研磨用液态氮冷冻的组织(见下文),然而,于室温下研磨固体,这类器具仍是不可或缺的。对于样品偶尔需要研磨,使用杵和研砵是可行的,但若需要大量产量,则搅拌机(mixer mills)这类的工具是较为实际的。
优点:
杵和硏砵是很简易使用的工具,且价格便宜。使用干磨,达到破碎效果,产生非常小的颗粒。
限制:
杵和硏砵的产量很低。另外也要考虑在研磨的过程中可能产生粉尘污染样品。虽然杵和硏砵都很坚固,但许多是用玻璃或瓷器制成,落下可能碎掉或产生裂缝。


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