酵母（S.cerevisiae ）直接转化试剂盒

上一篇 / 下一篇 2014-11-03 15:23:03

酵母（S.cerevisiae ）直接转化试剂盒

本品为出芽酵母（Saccharomyces cerevisiae）转化试剂盒。无需预先进行菌体离心、洗净操作，可直接向酵母培养液加入目标质粒和专用试剂，是一步即可完成转化的试剂。值得一提的是利用96孔板可导入多种检体，简单加入4850种重组体也成为可能，因而可进行染色体的筛选。

[特点]
·加入了目标质粒和专用试剂的一步完成型。
·感受态细胞无需调制。
·使用96孔板可进行多检体处理。
·适应HT的低粘性试剂。

[转化效率]
向BY4737株导入pRS316时的转化效率。

	形质转化效率 (cfu/μg)
软管法	≥5,000
96孔感光板法	≥500

[试剂盒内容]

	20次用	100次用	500次用
Sc Transformation Reagent	500μl	2.5ml	12.5ml
Carrier DNA(5μg/μl)	50μl	250μl	1.25ml

[操作方法]
■ 软管法

<酵母的培养>
2ml YPD培养基
↓←菌种接入，调制至OD₆₀₀：0.01
↓←取1ml至14ml的试管中
↓←在28~30℃振荡培养,至OD₆₀₀：3.5~5.0
培养酵母液……（A）

<转化>
1.5ml的离心管
↓←将25μl质粒和试剂混合液混合
↓←加入25μl培养酵母液（A）在42℃恒温箱中放置2小时
↓←加入150μl灭菌水

预处理
↓在28~30℃的恒温箱中放置2~3天
转化后的酵母

■ 96孔板法

96孔板
↓←加入25μl YPD培养基
菌种接入
↓在28~30℃情况下静置培养18~24
菌体悬浊
↓←将25μl质粒和试剂混合液混合
在37℃的恒温箱中放置2小时
5~10μl spotting
↓在28~30℃的恒温箱中放置2~3日
转化的酵母
*质粒·试剂混合液 (25μl /管, 25μl/孔)

·Sc Transformation Reagent…20μl
·质粒DNA………………………1μg
·Carrier DNA……………………2μl
调制25μl灭菌水

[保存条件]

-20℃保存

[产品资料]

产品编号	品名	规格	容量
296-62701	S.Cerevisiae Direct Transformation Kit, Wako 酵母（S.cerevisiae ）直接转化试剂盒	基因研究用	20次用
292-62703			100次用
290-62704			500次用

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