玄参的高效液相色谱检测方案

-玄参- 
    本品为玄参科植物玄参的干燥根。冬季茎叶枯萎时采挖，除去根茎、幼芽、须根及泥沙，

晒或者哄至半干，堆放3-6天，反复数次至干燥。
   【性状】
    本品呈类圆柱形，中间略粗或上粗下细，有的微弯曲，长6-20cm，直径1-3cm。表面灰黄

色或灰褐色，有不规则的纵沟、横长皮孔样突起和稀疏的横裂纹和须根痕。质坚实，不易折断，

断面黑色，微有光泽。气特异似焦糖，味甘、微苦。
    以下是我公司利用STI501高效液相色谱仪对玄参进行的HPLC检测方案。

1、仪器与试剂

  1.1仪器、设备
    STI501高效液相色谱仪，waters 515高效液相色谱仪
  Vertex 色谱柱：250mm×4.6mm×5μm
    分析天平
    旋转蒸发仪
    分液漏斗250ml
    振荡器
    针头过滤器
    微孔滤膜：0.45µm

  1.2试剂
    甲醇（色谱纯）
    正丁醇
    三氯甲烷
    磷酸

2、供试品溶液和对照品溶液的制备

供试品溶液的制备，取哈巴苷对照品，哈巴俄苷对照品适量，精密称定，加30%甲醇制

成每1ml含哈巴苷60ug，哈巴俄苷20ug的混合溶液，即得。
    供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号塞）约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，

精密加入50%的甲醇50ml，密塞，称定重量，浸泡1小时，超声处理（功率500w，频率

40kHz）45分钟，放冷，在称定重量，用50%的甲醇弥补减失的重量，摇匀，滤过，取

续滤液，即得。
    

3、色谱条件
    色谱柱：C18, 4. 6 mmx250 mm，粒度5 µm
    流动相：以已腈为流动相A，以0.03%的磷酸溶液为流动相B，按下表规定经行梯度洗脱；
    波长：210nm
    流速：1. 0 mL/min 

4、测定法

    分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。

5、谱图
 

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