液相色谱常见问题及处理方法(简易版)1
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下一篇 2013-01-21 15:54:22
一、峰拖尾
峰拖尾的原因有很多,我们首先从最简单最容易操作的开始排查。
可能原因一:系统的死体积过大。这点特别容易发生在新手使用时,没注意管路接头的正确连接。
解决方法:将HPLC系统的管路接头按流动相的走向检查一遍,按正确的连接方法连接好,尤其注意连接进样阀和柱子的部分。正确的连接方法:管路先伸出接头一段,长一点没关系,连接的时候注意将伸出的管路插到底部(一定要插到底),然后再慢慢的把接头往前推拧紧。需要注意的是,7725i进样阀的密封嘴锥度和普通的不太一样,连接阀的尽量用阀原装的密封嘴。
可能原因二:色谱柱未平衡好。在使用含有缓冲盐或者表面活性剂的流动相时,色谱柱的平衡时间往往很长,往往就会出现心急不想等时间的时候,这个时候进样出来的结果就可能出现峰拖尾等峰型异常的现象。
解决方法:耐心等待。另外,对于比较难平衡的体系,时间1h以上的,建议改用正常流速的一半平衡色谱柱,这样平衡时间也不会增加,还节约了流动相。
可能原因三:色谱柱污染。
解决方法:首先按色谱柱的出厂条件用标准样品测试柱效,如果依然拖尾,说明色谱柱污染,按照说明书条件进行清洗或更换新的色谱柱。如果用到预柱的话,先试试更换或清洗预柱。
可能原因四:流动相问题。使用了不恰当的流动相条件也会出现峰拖尾现象。
解决方法:更改流动相条件。
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