气液色谱填充柱的制备方法详细介绍

色谱柱又称分离柱，是填充了色谱填料的内部抛光不锈钢柱管或塑料柱管。色谱柱是实现分离的核心部件，要求色谱柱的柱效高、柱容量大和性能稳定。分析型色谱柱的内径通常在4~8mm，柱长通常在50~250mm。液相色谱填充柱内径通常在3~5mm，典型的柱内径是4mm。气相色谱中所用毛细管柱的内径一般小于1mm。微型柱是内径在1mm左右的填充型色谱柱，通常用于高灵敏的微量成分分离。因为气相色谱的载气种类少，分离选择性主要依靠选择固定相。色谱峰能否分离，首先取决于固定相，迄今已有数百上千种气相色谱固定相，常用的不过十几种。

未知样品可以先在QF—1上分离，而后换成OV—17，若有所改善，再减小到SE—30。若由QF—1到OV—17分离度变坏，可增加极性。然后再细分。

气液色谱填充柱的制备:

一、根据样品选择固定液、载体；

二、根据固定液选择溶剂；

三、根据配比和所需固定相的量，计算所需固定液的量、载体的量；

例如：固定相20克，固定液DNP含量为10%，用101白色载体制备气液色谱填充柱。计算：所需DNP固定液是2克，101白色载体是18克。

四、涂渍

将称好的固定液放在一个烧杯中，加入适量的溶剂溶解。将称好的载体，倒入溶解好固定液的烧杯中，在适当的温度下，轻轻摇动烧杯，让溶剂均匀挥发。如果溶剂沸点高，可在红外灯泡下烘干，直至载体呈颗粒状、没有溶剂气味-为止。

五、柱的填充

（一）柱的清洗：依次用自来水--5%NOH--蒸馏水--丙酮--馏水清洗，然后烘干。

（二）柱的填充：用玻璃棉将柱的一端（接检测器的一端）塞牢，经缓冲瓶与真空抽气机连接，柱的另一端接一漏斗，徐徐倒入涂有固定液的载体，边抽真空边轻敲柱管，直至装满为止。用玻璃棉塞紧柱的另一端口。

六、柱的老化

（一）目的：彻底除去填充物中的残留溶剂和某些挥发性的物质；也促使固定液均匀牢固地分布在载体的表面上。

（二）方法

在常温下使用的柱子，可直接装在色谱仪上，接通载气，冲至基线平稳即可使用；如果新装填好的色谱柱要在高温操作条件下应用，则要将装填好的色谱柱接入色谱仪中，但柱出口不与检测器相连，以防止加热时从柱内挥发出的杂质污染检测器。在操作温度低于最高使用温度下，通入载气，将柱加热几小时至几十小时，这一过程为老化。老化时，升温要缓慢，老化后，将色谱柱与检测器连接上，待基线平直后就可进样分析。

文章来源：http://www.getulab.com/article.php?id=4551