二硫代苏糖醇, DTT

上一篇 / 下一篇 2014-11-19 15:16:23/ 个人分类：2014-11

二硫代苏糖醇, DTT

二硫代苏糖醇（DTT），又称克莱兰试剂，是一种重要的化合物,用于定量减少二硫键和保持还原状态下的巯基。低浓度时，DTT可以稳定带有自由巯基基团的酶，并且可恢复因体外氧化失活的基团活性。DTT是一种很强的还原剂，其还原性很大程度上是由于其氧化状态六元环（含二硫键）的构象稳定性。

DTT很容易渗透细胞膜，使其在医药工业中用于高收率地提取与分离蛋白质。高浓度时，DTT是一种有效的蛋白质变性剂，用于断开多肽中半胱氨酸基团的二硫键。

DTT的不同应用使它在稳定酶、抗体和生长因子时极其有价值，以及在蛋白质结构分析的各项研究中应用广泛。

DTT与巯基乙醇作用相似，但刺激性气味要小很多，毒性也低很多，而效果相当的情况下，DTT的使用浓度比巯基乙醇低7倍，缺点是DTT价格略高一些。

基础信息

产品名称：DL-1,4-二硫代苏糖醇; 1,4-二巯基苏糖醇

英文名：DL-1,4-Dithiothreitol

别名：Dithiothreitol; threo-1,4-Dimercapto-2,3-butanediol; Cleland's reagent; DTT

分子结构： DTT

分子式：C₄H₁₀O₂S₂

分子量：154.25

CAS号：3483-12-3

EINECS号：222-468-7

应用

蛋白质的大规模分离和纯化，是酶、抗体和生长因子研究领域重要的试剂

有机合成中重要的巯基基团保护试剂

可用于阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。

巯基化DNA末端硫原子在溶液中趋向于形成二聚体，大大降低了偶联反应实验（如DNA在生物感应器中的固定）的效率；在DNA溶液中加入DTT，反应一段时间后除去就可以降低DNA的二聚化。

叠氮化合物的还原

蛋白质化学 - 高水平的重组蛋白表达通常会产生蛋白质聚集和包埋体积累。DTT在处理蛋白质二硫键时，是增加蛋白质聚集溶解度的关键因素。DTT裂解二硫键和保持相关的半胱氨酸处于还原状态，但DTT往往无法还原包埋于蛋白质结构内部的二硫键，此类还原常常需要先将蛋白质变性，如高温加热或加入变性剂增溶缓冲液，通常包括6 M盐酸胍或8 M尿素的变性剂，100 mM的Tris-HCl，10 – 100mM的DTT

最普遍的蛋白复性方法是使用增溶缓冲液稀释。复性缓冲液的浓度最终取决于0-2 M 盐酸胍或尿素，0-2mM DTT和10-100mM的Tris HCl。缓冲液的复性可用于谷胱甘肽、氧化型谷胱甘肽、磺基甜菜碱、环糊精、（+）-反式-1,2 -双（巯基乙酰氨基）环己烷、三甲胺N-氧化物，和其他蛋白质，例如分子伴侣或折叠酶。在一些大规模蛋白质折叠和纯化中，DTT还用于防止不良的氧化。