高温干热灭菌监测办法

　　干热灭菌的效果监测办法：

　　a、化学监测法

　　检测方法：将既能指示温度又能指示温度持续时间的化学指示剂3个~5个分别放入待灭菌的物品中，并置于灭菌器最难达到灭菌的部位。经一个灭菌周期后，取出化学指示剂，据其颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条件。

　　b、物理检测法(热电偶检测法)

　　检测方法：检测时间，将多点温度检测仪的多个探头分别放于灭菌器各层内、中、外各点。关好柜门，将导线引出，由记录仪中观察温度上升与持续时间。若所示温度(曲线)达到预置温度，则灭菌温度合格。

　　c、生物检测法

　　(1)指示菌株：枯草杆菌黑色变种芽孢(ATCC9372)，菌片含量为5.0×105 cfu/片~5×106cfu/片。其抗力应符合以下条件：在温度160℃±2℃时，其D值为1.3~1.9min，存活时间≥3.9min，杀灭时间≤19min。

　　(2)检测方法：将枯草杆菌芽孢菌片分别装入灭菌试管内(1片/管)。灭菌器与每层门把手对角线内，外角处放置2个含菌片的试管，试管帽置于试管旁，关好柜门，经一个灭菌周期后，待温度降至80℃时，加盖试管帽后取出试管。在无菌条件下，加入普通营养肉汤培养基(5ml/管)，以36℃±1℃培养48h,观察初步结果，无菌生长管继续培养至第七日。

　　(3)结果判定：若每个指示菌片接种的肉汤管均澄清，判为灭菌合格，若指出菌片之一接种的肉汤管混浊，判为不合格，对难以判定的肉汤管，取0.1ml接种于营养琼脂平板，用灭菌L棒涂匀，放36℃±1℃培养48h，观察菌落形态，并做涂片染色镜检，判断是否有指示菌生长，若有指示菌生长，判为不合格;若无指示菌生长，判为灭菌合格。