转基因大豆检验仪器

　　内容摘要：样品中DNA的提取——CTAB法将100rag充分粉碎的大豆样品，在液氮中充分研磨成粉末后加400pL冰上预冷的cTAB提取缓冲液I中。加入500txI。65~C预热的CTAB提取缓冲液间不时轻缓颠倒混匀。待冷却至室温后加入储备溶液，室温下放置30rain。加入450gL三氯甲烷+异戊醇，轻缓颠倒混匀溶液。

　　通常实验室仪器设备、高速冷冻离心机(12000r/min)、高速台式离心机(12000r/min)、紫外分光光度计、磁力搅拌器、高压灭菌锅、PCR扩增仪、电泳仪、紫外透射仪、凝胶成像系统或照相系统、重蒸馏水仪。

　　样品中DNA的提取——CTAB法将100rag充分粉碎的大豆样品，在液氮中充分研磨成粉末后加400pL冰上预冷的cTAB提取缓冲液I中。加入500txI。65~C预热的CTAB提取缓冲液间不时轻缓颠倒混匀。待冷却至室温后加入储备溶液，室温下放置30rain。加入450gL三氯甲烷+异戊醇，轻缓颠倒混匀溶液。

　　将上清液转移至干净的离心管中，依次加600pL异丙醇及60弘L乙酸钠溶液，轻缓颠倒混匀。12000r/min离心10min。，弃上清液后再加入100ffL 70%乙醇洗涤沉淀。12000r/min离心5min，弃上清液。除去残留的乙醇，待沉淀干燥后，DNA沉淀溶解于100ffL TE缓冲液中，一20℃保存备用。

　　样品中DNA的提取也可采用商品化基因组提取试剂盒提取。DNA溶液纯度的测定和保存将DNA适当稀释，测定并记录其在260nm和280nm的紫外光吸收率，以一个OD260值相当于 50fig/mI.DNA浓度来计算纯化的DNA浓度。要求DNA溶液()D260/()D280值在1.7～2.O。依据测得的浓度将DNA溶液稀释到 25～50ng/mI.，一20℃保存。注：由于基因组DNA不宜反复冻融，因此建议对于需要经常使用的DNA需要分装，多管存放，需要使用时取出，融化后应该立即使用，使用结束后，剩余的DNA应在4℃冰箱短期保存，存放时间不宜超过14d。