水溶性维生素的测定

一、维生素B₁的测定

V_B1又叫硫胺素

1、食品中V_B1的存在形式

⑴ 常以游离态存在；

⑵复合脂形式存在（磷蛋白）；

⑶ 辅羧酶形式存在

V_B1在酵母、米糠、麦胚、花生、黄豆以及绿色的蔬菜和牛乳、蛋黄中比较丰富，动物组织不如植物含量丰富。

2、V_B1的性质

⑴ V_B1在中性、碱性下不稳定，易分解；

⑵ V_B1在酸性条件下稳定，即使加热酸性也稳定；

⑶ V_B1为白色结晶，微溶于C₂H₅OH，不溶于乙醚或CHCl₃，易溶于水。

3、V_B1的测定

世界各国都用荧光法测定

⑴ 原理：硫胺素在碱性铁氰化钾溶液中，被氧化成一种兰色荧光物质，即为硫色素，在紫外光

下，硫色素发出荧光。

⑵ 方法

① 萃取

100g样品于干燥烧杯中，加入100ml0.1N H₂SO₄，打成匀浆，煮沸30分钟，称取一定的样品经高压锅121℃、20分钟高压酸解

② 水解

在酸解的样品中冷却后加入含有10%糖化酶的10ml2.5MNaA_C溶液，摇匀，用15%NaOH调PH=4.5，用淀粉酶使淀粉水解，也可用磷酸酶使淀粉水解，于50℃恒温箱中12小时

③ 纯化

采用柱层析提纯

吸附剂采用的是人造浮石。人造浮石用25%KCl溶液分数次洗涤，主要是把V_B1吸附上去，吸附上去后，再用热水淋洗，最后用25%KCl-HA_C把V_B1洗脱下来，这样就得到纯V_B1，再根据上面的原理在碱性下分析。

④ 分析　

装填柱子（离子交换柱）→ 提纯 → 氧化 → 测定