PBS溶液的配置
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下一篇 2012-08-14 15:40:57/ 个人分类:文件
另附1N(当量)NaOH溶液的配置方法:
1L溶液中所含溶质的Eq数(或1ml溶液中所含溶质的mEq数)表示的浓度,称为当量浓度。
N = 溶质的质量(g或mg)/ (溶质的当量×配置溶液的体积)
酸的当量 = 分子量 / 酸分子中被金属置换的氢原子数
碱的当量 = 分子量 / 碱分子中氢氧根数
盐的当量 = 分子量 / 盐分子中金属原子数的金属总价
例:配1 Eq/L NaOH水溶液100ml(即0.1L)
NaOH 分子量40
NaOH 当量为40 / 1 = 40
设需要NaOH质量为X
有:1 = X / (40×0.1)
X = 4 g
称取4g NaOH溶解于100ml双蒸水中,NaOH浓度即为1个当量
0.1M PBS:1000ml蒸馏水中加
NaCl 9g
Na2HPO4.12H2O 6g
NaH2PO4 .2H2O 0.4g
PH:7.2
为博士德配方
分子克隆上的PBS配方:
NaCl: 8.00g
KCl: 0.20g
Na2HPO4*H2O: 1.56g
KH2PO4: 0.20g
1. 0.01mPBS (PH7.4)
Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠) 3.473g
NaH2PO4•12H2O(磷酸二氢钠) 0.226g
Nacl 0.9g
三蒸水 1000ml
2. 加氯化钠的称PBS,加氯化钾、氯化钠的称KPBS。不加氯化钠、氯化钾的称PB。
关于缓冲溶液PB的配制,好多参考书如生物技术实验的后面均附有缓冲溶液的配制配方,可以根据需要配制PH5.7~8.0的PB缓冲溶液。S就是指氯化钠的含量,一般为0.85%,即是100ml里面加0.85克,这个时候的PBS的浓度是0.1M的。一般在免疫组化洗涤中采用0.01M的PBS,pH7.0~7.4。我们在实验中直接将0.1M的稀释十倍,即可。最好能现配现用。母液4℃可以保持1~2周,影响不大。
0.01M PBS (PH 7.2)(g/ L)
NaCl 8.0
KCl 0.2
KH2PO4 0.2
Na2HPO4.12H2O 2.9
用1N的NaOH调节PH 值至7.2
ddH2O定容至1000ml,高压灭菌
0.01PBS液:
NaH2PO4.2H2O 0.5g
Na2HPO4.12H2O 5.9g
NaCl 9g
加双蒸水至1000ml差不多刚好pH7.4
PBS的配制
称取NaCl 8.00g KCl 0.20g KH2PO4 0.20g Na2HPO4•H2O 1.56g,加入蒸馏水至总体积为1000ml,溶解后过滤除菌待用。
0.01mol/L,pH7.4的PBS
0.2mol/L Na2HPO4 81ml
0.2mol/L NaH2PO4 19ml
氯化钠 17g
蒸馏水加到 2000ml
其实道理是一样。
0.1M的PB(不加氯化钠)配方:
1.储备A液,磷酸氢二钠35.6克,加重蒸水溶解至1000ml。
储备B液,磷酸二氢钠13.8克,加重蒸水溶解至500ml。
2.工作液(0.1M),PH A液(ml) B液(ml) 重蒸水(ml)
7.0 30.5 19.5 50
7.4 40.5 9.5 50
8.0 47.35 2.65 50
0.1M的PBS配方:
储备A液: 1M的氯化钠溶液(氯化钠5.844克,加重蒸水至100ml )
储备B液:0.2M磷酸氢二钠(Na2HPO4 5.678克加重蒸水至200ml 或Na2HPO4•12H2O14.32克加重蒸水至200ml ;
储备C液:0.2M 的磷酸二氢纳(NaH2PO4)2.76克加水至100ml或(NaH2PO4•12H2O)3.12克加重蒸水至100ml;
工作液:A液 12.5ml 62.5ml 12.5ml
B液 8.1ml 40.5ml 81ml
C液 1.9ml 9.5ml 19ml
加重蒸水至 100ml 500ml 1000ml
(在工作液中 磷酸缓冲液浓度为0.1M,L氯化钠浓度为0.125M,PH为7.3—7.4,于4度冰箱中克保存三月)
我纯化蛋白用的PBS:1.37 mM 的 NaCl 8g,2.7 mM的 KCl 0.2g,10 mM 的 Na2HPO4·12H2O 3.58g,2 mM的KH2PO4 0.27g,然后加NaOH 用PH计调PH值8.0。
从美国来的配方,我们实验室一直用的这个,很好使的!我们科在临床上做了很多免疫组化,结果很漂亮。
是工作浓度,根据自己的要求配浓缩液
Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠) 13.42g
NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠) 1.95g
Nacl 42.5g
三蒸水 5000ml
关键是pH,一定要调在7.4左右,其实配方都差不多,关键是pH。
可以用NaOH和盐酸调。
(1)0.2M Na2HPO4: Na2HPO4·12H2O 71.64g加蒸馏水至1000ml;
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