标准正文
风疹减毒活疫苗（兔肾细胞）
|
汉语拼音:
Fengzhen Jiandu Huoyimiao（Tushen Xibao）
英文名:
Rubella Vaccine（Rabbit Kidney Cell），Live
药物组成:
本品系用风疹病毒减毒株接种原代兔肾细胞，经培养、收获病毒液，加入适宜稳定剂后冻干制成。
用途:
用于预防风疹。
中西药分类:
生物制品（预防类）
生物制品制备:
1 基本要求
生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”有关要求。
2制造
2.1生产用细胞
生产用细胞为清洁级家兔的原代兔肾细胞。
2.1.1细胞管理及检定
应符合“生物制品生产用动物细胞基质制备及检定规程”规定。
2.1.2细胞制备
选用25-30日龄的清洁级家兔，无菌取肾，用胰蛋白酶消化，分散细胞，置37℃或适宜温度培养。
2.2毒种
2.2.1名称及来源
生产用毒种为风疹病毒松叶株。
2.2.2种子批的建立
应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”规定。
疫苗生产应基于病毒种子批系统，风疹病毒松叶株毒种生产的疫苗应不超过第19代。
2.2.3种子批毒种的检定
主种子批应进行以下全面检定，工作种子批应至少进行2.2.3.1-2.2.3.4项检定。
2.2.3.1鉴别试验
将稀释至100-500 CCID50/ml 的病毒液与适当稀释的抗风疹病毒免疫血清等量混合后，置37℃水浴60分钟，接种RK-3细胞，置32℃培养14天判定结果，风疹病毒应完全被中和（无细胞病变）；同时设血清和细胞对照，均应为阴性；病毒对照的病毒滴度应不低于100CCID50／ml。
2.2.3.2病毒滴定
取毒种做10信系列稀释，每个稀释度病毒液接种RK－13细胞，置32℃培养14天判定结果。病毒滴度应不低于4.8lg CCID50/ML。应同时进行病毒参考品滴定。
2.2.3.3无菌检查
依法检查（附录Ⅻ A），应符合规定。
2.2.3.4克原体检查
依法检查（附录Ⅻ B），应符合规定。
2.2.3.5病毒外源困于检查
依法检查（附录Ⅻ C），应符合规定。
2.2.3.6免疫原性检查
用主种子批毒种制备原疫苗，按常规接种易感儿童至少30名，分别于免疫前及免疫后4-6周采血，测定风疹病毒抗体，抗体阳转率应不低于95%（HI法＜1:8为阴性，HI法≥1:8为阳性）。
2.2.3.7猴体神经毒力试验
主种子批或工作种子批的毒种应进行猴体神经毒力试验，以证明无神经毒力。每次至少用10只风疹抗体阴性的易感猴，每侧丘脑注射0.5ml（应不低于1个人用剂量的病毒量），观察17-21天，不应有麻痹及其他神经症状出现。注射后48小时内猴死亡数不超过2只可以更换；如超过20%，即使是非特异性死亡，试验也不能成立，应重试。观察期末，每只猴采血测风疹病毒抗体，阳转率应不低于80%，并处死解剖，对大脑和脊髓的适当部位做病理组织学检查，应为阴性。每次试验同时有2只易感猴作为对照，待试验猴处死后10天，第2次采血，对照猴风疹抗体应为阴性。
2.2.4毒种保存
冻干毒种应置-20℃以下保存，液体毒种置-60℃以下保存。
2.3原液
2.3.1细胞制备
同2.1.2项。
2.3.2培养液
培养液为含适量灭能小牛血清和水解乳蛋白的MEM培养液或其他适宜培养液。小牛血清的质量应符合要求（附录Ⅻ D）。
2.3.3对照细胞病毒外源因子检查
依法检查（附录Ⅻ C），应符合规定。
2.3.4病毒接种和培养
细胞在37℃长成单层后，按适当比例接种病毒，置30-32℃培养，当细胞出现一定程度病变时，倾去培养液，用不少于原培养液量的洗液洗涤细胞表面，换含人血白蛋白的MEM、199或其他适宜的维持液。
2.3.5病毒收获
当细胞病变达到相当程度时，收获病毒液，换以新的维持液继续培养，适当时间内可多次收获病毒液。收获的病毒液冻存于-20℃以下。
2.3.6合并
同一细胞批生产的多次病毒收获液可合并为一批原液。
2.3.7原液检定
按3.1项进行。
2.4半成品
2.4.1配制
根据病毒滴度可对原液进行适当稀释，并按一定比例加入适宜稳定剂，即为半成品。多批原液可以合并成一批半成品。
2.4.2半成品检定
按3.2项进行。
2.5成品
2.5.1分批
应符合“生物制品分批规程”规定。
2.5.2分装及冻干
应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。
2.5.3规格
按标示量复溶后每瓶0.5ml、1.0ml。每1次人用剂量为0.5m1，含风疹活病毒应不低于3.2 lg CCID50。
2.5.4包装
应符合“生物制品包装规程”规定。
3检定
3.1原液检定
3.1.1病毒滴定
按2.2.3.2 项进行，病毒滴度应不低于4.8 lg CCID50/ML。
3.1.2无菌检查
依法检查（附录Ⅻ A），应符合规定。
3.1.3支原体检查
依法检查（附录Ⅻ B），应符合规定。
3.2半成品检定
无菌检查
依法检查（附录Ⅻ A），应符合规定。
3.3成品检定
除水分测定外，应按标示量加入灭菌注射用水，复溶后进行其余各项检定。
3.3.1鉴别试验
按2.2.3.1项进行。
3.3.2外观
应为乳酪色疏松体，复溶后为橘红色澄明液体，无异物。
3.3.3水分
应不高于3.0%（附录Ⅶ D）。
3.3.4病毒滴定
取疫苗3-5瓶混合滴定，按2.2.3.2项进行，病毒滴度应不低于3.5 lg CCID50/ML。
3.3.5热稳定性试验
疫苗出厂前应进行热稳定性试验，应与病毒滴定同时进行。于37℃放置7天后，按2.2.3.2项进行，病毒滴度应不低于3.5 lg CCID50/MLml,毒滴度下降应不高于1.0 lg。
3.3.6牛血清白蛋白残留量
可采用酶联免疫法，牛血清白蛋白残留量应不高于50ng/剂。
3.3.7无菌检查
依法检查（附录Ⅻ A），应符合规定。
3.3.8异常毒性检查
依法检查（附录Ⅻ F），应符合规定。
4保存、运输与有效用
于8℃以下避光保存和运输，自病毒滴度检定合格之日起，有效期为1年6个月。
5使用说明
风疹减毒活疫苗（兔肾细胞）使用说明
|
移动版：