高分辨率熔解应用
高分辨率熔解分析 (HRM) 可在 PCR 后快速监测并记录样品中扩增子的熔解曲线。HRM 的高灵敏度有利于检测由 DNA 中单个碱基变化、核苷酸重复以及小片段缺失等因素引起的熔解温度的微小变化。
HRM 越来越多地应用于:基因型确证、突变鉴定及筛查、克隆确认及甲基化分析。
HRM 常用于在高变基因中寻找难以检测的碱基变化。HRM可检测容易被 TaqMan 检测法遗漏的新突变或未知突变。与TaqMan 检测法相比,HRM 可检测两个引物间的任意突变。
虽然 HRM 可以更经济有效地分辨细微变化,但需要严格进行熔解温度控制。
Brilliant HRM Ultra-Fast Loci 反应预混液的优势
• 混合后立即可用。其中含有 MgCl2 及 dNTP
• 稳定性更好。多次冻融后仍保持稳定,可减少浪费并提高批间可靠性
• 快速启动 Taq。快速启动的专利 Taq 聚合酶突变体只需三分钟即可活化
• EvaGreen 按需释放型染料。这种染料无毒,能够以饱和浓度添加,可在保持高灵敏度的同时确保抑制性最小化
• 跨平台使用。可用于任意具有 HRM 功能的热循环仪Brilliant HRM Ultra-Fast Loci 反应预混液
现在,安捷伦可以为科学家提供 Brilliant HRM Ultra-Fast Loci反应预混液,以帮助他们实现更快捷、更可靠的“混合后立即
可用”功能。此反应预混液包含快速启动 Taq 聚合酶突变体、经优化的 MgCl2、dNTP 以及一种按需释放染料 EvaGreen,即
使是难以分析的基因型,也能实现信心十足的快速 HRM 分析。此预混液经验证可用于 AriaMx 实时 PCR 仪器及具有 HRM 功能的第三方热循环仪。