样品或标样重现性不好的原因及解决方法

上一篇 / 下一篇  2010-07-28 11:31:05

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  在液相分析过程中,有时会遇到样品标样重现性不好.现这里有一篇这方面的文章与大家分享!

  样品或者标品的重现性不好,下面本人根据自己的经验把原因和处理方式给大家分享一下。

  不要笼统说重现性不好,要细分两种情况:单独样品重现性不好;样品和标品的重现性不好。

  (一)如果单是样品的重现性不好而标品的重现性可以的话,原因比较容易分析。问题可能出现在样品本身上。

  1)样品降解或者分解,当你的样品在稀释液中不稳定,这种情况是很有可能发生的。解决办法:改变稀释溶液,要是遇水

  分解的流动相中不能有水,必要时还等改用正向色谱

  2)样品溶解时间不足。比如当你进第一针时候假设样品溶解率为90%,后一针为95%,以后随着时间延长而增加,这样。

  你重现性肯定不好。这种情况的判定比较简单,不要肉眼看容量品是否有不容物,你的眼睛没有那么高的分辨率,只要把 容量瓶超声一下,看看超声前后的对比就可以判断。如果是这种问题,解决方法简单,在处理样品时加入少量的易容溶 剂,超声5秒左右,再用你的稀释液定容,一般就可以解决。

  3)样品称量问题。当你做同一容量瓶的样品取得很好的重现,而在同一样品不同容量瓶中存在重现不好的情况。可能就是 你的称量中出了问题。具体哪里的问题,我没有肯定的答案,但是可以肯定的是,你必须要重新称量,并复检,按着要求。 可是要加倍复检的,所以每次称量你都必须小心。此外,还可能是容量瓶本身不准,不过这个可能性比较小,建议用 100ml容量瓶。因为容量瓶越小误差越大,这点我做过验证的,在国内可以作为“真理”。真理就不要在耗时费事验证了。

  (二)样品和标准品同时出现重现性不好的情况。

  这种情况比上一种可能要稍微复杂一些。但是也比较好分析。

  首先,不要笼统说重现性不好。也有两种情况,一是保留时间较好,只是响应值不好;二是两者都不好。

  如果是第一种情况,请参考(一)中的分析,这里不赘述。

  如果保留时间和响应值都不好可能的原因如下:

  1)柱温的影响。柱子温度和保留时间的关系,一般是反向的,即柱温越高保留时间越短,反之亦然。但是柱温不仅会对保留时间有影响,还会影响响应值也就是峰面积。一般来讲保留时间提起会使峰宽变小和峰高变大,但他们两者的对于峰面积的作用一般不会正好抵消,也就是说面积有所变化的。所以,柱温箱是必要的。如果你还没有赶快和老板说,如果不给 买,就说是我说的。哈哈!

  2)流速和柱压的问题。首先要知道在液相色谱中是用流速控制柱压的,流速你要设定的,而柱压是配合你的流速仪器自行控制的。柱压是流速的因,流速是柱压的果。当你系统正常运行时突然柱压降低,这个时候流速会突然降低,样品的保留时间会延后,当然也就造成重现性的不好了。还有柱压波动较大的时候,也不会有好的重现性(保留时间和响应值)。

  3)其他比较少见的情况。灯的能量不足。表现为,保留时间可以,但是响应值逐渐降低。解决办法:换灯。说实在的这种情况比较少见,至少我没有遇到过。有些色友在分析类似的问题时上来就说人家的灯可能不行了,我觉得这是很站不住脚的一种说法。首先氘灯的平均使用寿命为3000小时,每天8小时的话可以用375天(一年半使用时间),也就是说这种情况如果成立的可能性为1/375,而且未必成立。其次,一般仪器开机时都有自检的(国产仪器我不清楚,至少watersagilent是有的),自检通过了一般工作1天是一点问题都没有的。我曾经在自检初次通不过情况下使用半月也没有问题(一次不通过,关机,停一会再开机)。第三,我认为灯能量的衰减速度是随着你灯能量降低而降低的。这个是我个人的观点。好比100元的股票每天跌10%,第一天下跌10元,第十天下跌多少我就不算了,反正比10元少很多。扯远了,这个观点套用到这里就是,灯的能量低事实,不支持短短一天时间内重现性不好这个现象,也可以近似说等能量低与检测重现性不好无关。看似比较矛盾,我的论据在反对我的论点。但是我想这就是我的态度,因为这种情况我没有遇到过,而我推论也仅仅是推论,加之有的色友一再强调,未免心虚,故而矛盾一把吧。

  结束语, 如果你遇到的问题用我提供的思路解决了,那么祝贺你。如果解决不了也不要骂我,说我误导你浪费你的时间,其实有些时候你遇到的问题不是单一一个原因造成了,需要综合考虑,并解决。




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TAG: 样品 标样重现性

aasle 引用 删除 aasle   /   2010-09-13 15:49:08
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