水产品中呋喃唑酮残留量的测定 高效液相色谱法
1。范围
本标准规定了水产品中呋喃唑酮残留量的测定方法──高效液相色谱法。
本标准适用于水产品可食部分中呋喃唑酮残留量的测定。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，
其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据
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，其最新版本适用于本标准。
GB/T 6682-1992 分析实验室用水规格和试验方法
3 原理
样品中呋喃唑酮用二氯甲烷提取，蒸发浓缩提取液，无水硫酸钠去除水分，用正己烷液-
液萃取除去脂肪及其它杂质，离心，取下层清液经膜过滤器后用高效液相色谱仪分离，
紫外检测器检测，外标法定量。
4 试剂和材料
4.1 乙腈：色谱纯。
4.2 二氯甲烷：色谱纯。
4.3 正己烷：分析纯，用乙腈饱和。
4.4 85%磷酸：分析纯。
4.5 乙腈水溶液：乙腈+水(体积分数为80+20)。
4.6 无水硫酸钠：分析纯;经640℃灼烧4.0h后，贮于密闭容器中备用。
4.7 无水硫酸钠柱：200mm×24mm(id)，内装50mm~100mm高的无水硫酸钠。
4.8 呋喃唑酮标准品：纯度≥99.5%。
4.9 呋喃唑酮标准储备液：称取10.0mg呋喃唑酮，用乙腈水溶液溶解并稀释定容至50mL
棕色容量瓶中，在冰箱中冷藏保存，保存期一个月。该液 1mL相当于200μg呋喃唑酮。
4.10 试验用水：符合GB/T 6682一级水标准。
5 仪器和设备
5.1 高效液相色谱仪，配有紫外检测器。
5.2 高速组织捣碎机。
5.3 旋转蒸发仪。
5.3 离心机。
5.4 振荡器。
5.5 蒸发烧瓶，具塞。
5.6 刻度离心管。
5.7 膜孔滤器：0.45μm。 6 色谱条件
6.1 色谱柱：C18柱, 250mm×4.6mm(id)，粒度5μm。
6.2 流动相：乙腈+水+磷酸(体积分数为40+60+0.1)。
6.3 流速：0.8mL/min。
6.4 检测波长：365nm。
6.5 柱温：室温。
6.6 进样量：20μL。
7 样品测定
7.1 试样制备
取鱼、虾、蟹、鳖等水产品可食部分，切成不大于5mm×5mm×5mm的小块后混匀，经高速
组织捣碎机捣碎即可，充分混匀。
7.2 提取
称取捣碎样品约10g(精确至0.01g)，加25mL二氯甲烷搅拌分散后浸泡 15min，在振荡器
上振荡5min，提取液经无水硫酸钠柱滤入蒸发烧瓶中，残渣分别用25mL和15mL二氯甲烷
按上述方法各重复提取一次，再用15mL二氯甲烷冲洗无水硫酸钠柱，并采用洗耳球吹出
柱中液体，滤液均滤入同一蒸发烧瓶中，滤液于旋转蒸发仪上在45℃左右水浴下减压蒸
发去除溶剂，蒸发速度控制在每秒一滴。
7.3 净化
用1.0mL流动相和1.0mL正己烷溶解残渣并充分洗涤蒸发烧瓶，将液体移入离心管中，在4
000r/min离心5min，用尖嘴吸管移去上层正己烷层，再向离心管中加入1.0mL正己烷，混
匀 2min，离心，用尖嘴吸管移去上层正己烷层，下层清液经0.45μm膜孔滤器过滤后进HP
LC分析。
7.4 测定
7.4.1 呋喃唑酮标准工作液配制
临用前，取呋喃唑酮标准储备液，用流动相稀释成浓度为0.01μg/mL~1.00μg/mL的标准
工作液。
7.4.2 液相色谱测定
根据样品液中呋喃唑酮残留量情况，选定峰高相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样
品液中呋喃唑酮响应值均应在仪器检测线性范围内。对标准工作溶液和样品液等体积参
插进样进行测定。在上述色谱条件下，呋喃唑酮保留时间约为5.8min。
7.5 空白试验
除不加试样外，按7.2~7.4步骤进行。
8 结果计算与表述
根据标准工作液和样品液的峰高，按式(1)计算样品中呋喃唑酮残留量：
(h-h0)×V×1000
C=Cs ×--------------------------
hs×m
式中：
C──样品中呋喃唑酮残留量，单位为微克每千克(μg/kg);
h──样品液中呋喃唑酮的峰高;
hs──标准工作溶液中呋喃唑酮的峰高;
h0──空白试验的峰高;
Cs── 标准工作溶液中呋喃唑酮的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL);
V──样品液最终定容体积，单位为毫升(mL);
m──样品的称取量，单位为克(g)。
9 线性范围、检测限、回收率
9.1 线性范围
本方法的呋喃唑酮标准工作液线性范围为 0.01μg/mL ~1.00μg/mL。
9.2 检测限
本方法的检测限为1μg/kg。
9.3 回收率
本方法回收率为72.8%~96.2%。
分析化学 仪器分析 红外光谱
