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美国abraxis氟喹喏酮检测试剂盒

上一篇 / 下一篇  2010-08-11 15:27:36

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美国abraxis氟喹喏酮检测试剂盒

概述

氟喹诺酮检测试剂盒适用于检测氟喹诺酮的含量。这个检测适用于定量或定性检测水样或鱼虾产品。其他样品的提取步骤请与我公司联系。如果有必要可以通过HPLC, GC/MS或其他的传统方法证实测定结果。

储存和稳定性

氟喹诺酮检测试剂盒应该保存在4–8°C。在使用之前试剂盒中的试剂要恢复到室温。试剂盒在有效期内可以使用。结合物以低压冻干的形式保存(3瓶)。在检测前要用结合物稀释液配制一定量低压冻干形式保存的结合物。因为配制好的溶液仅能保存1周所以需要多少就配制多少。

原理

Abraxis氟喹诺酮检测试剂盒的原理是直接竞争酶联免疫反应。通过特异性抗体来识别氟喹诺酮。样品中氟喹诺酮和氟喹诺酮-HRP酶结合物竞争与溶液中兔抗氟喹诺酮抗体结合位点结合。这氟喹诺酮抗体与固定在微孔板上的二抗结合。洗板,加入底物显色剂发生显色反应;样品中的氟喹诺酮浓度与显现出的蓝色的深度成反比。加入反应终止液终止反应。在450nm波长进行检测,通过做标准曲线计算每个样品中氟喹诺酮的含量。

 

A试剂盒组成

196孔酶标板:包被有羊抗兔二抗,1块(12×8孔)。分析测试百科网9N9u]_6[p
2
氟喹诺酮标准品:7瓶,浓度分别为0, 0.025, 0.05, 0.125, 0.25, 0.5,1.0 ng/mL

3氟喹诺酮HRP酶标记物(结合物):3瓶(低压冻干保存),溶解后每瓶3ml

4、结合物稀释液12 mL:用于稀释氟喹诺酮HRP酶标记物

5、兔抗氟喹诺酮抗体:1瓶(6ml

6、样品稀释液25ml,用于稀释样品。

75×浓缩洗液:1瓶(100ml

8底物显色液(TMB):1瓶(12ml

9、终止液:1瓶(12ml)。

检测步骤

使用前将试剂盒和样品处理物提前从冰箱中拿出来使其达到室温。从铝箔袋中拿出要求数量的微孔条,放入干燥剂并重新封好袋子以免微孔条受潮。

1、在对应的微孔中加入50μL标准和样品(或样品提取液)。推荐做2-3个平行。

2、用多道移液器在每个测试孔都加入50 μL重新稀释的氟喹诺酮HRP酶标记物(结合物)

3、用多道移液器在每个测试孔都加入50 μL兔抗氟喹诺酮抗体溶液,用胶带盖上,通过移动酶标板来混合液体。

4、在室温下孵育60分钟

5孵育完成后,将微孔中的溶液倒入水槽中,用1X洗液加满微孔然后倒掉,拍板,去掉残留的洗液,重复三次,总共四次洗板。

6、每个测试孔加入100μL底物显色液。通过移动酶标板来混合液体,混合30秒。在室温下孵育20-30min,避免阳光直射。

7每个测试孔加入100μL终止液。

8、在加入终止液15分钟内,450nm下读取每个孔的吸光度值(OD

结果分析

可以利用商业ELISA软件程序比如Logit/Log or 4-Parameter来评价ELISA结果。也可以通过计算每个标准的%B/B0值,以%B/B0y轴、氟喹诺酮浓度为x作一标准曲线。样品浓度可以通过标准曲线来计算。当样品中氟喹诺酮的浓度大于1ng/ml时要稀释后再测定。

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