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玉米赤霉烯酮检测试剂盒

上一篇 / 下一篇  2010-09-04 10:56:49

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玉米赤霉烯酮检测试剂盒

适用

玉米赤霉烯酮检测试剂盒的原理是竞争ELISA,用于定量检测玉米,玉米粉,玉米胚芽粉,玉米蛋白粉,玉米/大豆中的玉米赤霉烯酮毒素。

原理

Abraxis玉米赤霉烯酮检测试剂盒的原理是竞争酶联免疫反应。利用甲醇水溶液提取样品中的玉米赤霉烯酮,提取液被过滤、稀释后待测。在混合孔中加入标准和样品,然后再加入玉米赤霉烯酮-HRP酶结合物。然后把样品与酶结合物的混合物转移到测试孔中开始反应。孵育10分钟,样品中的玉米赤霉烯酮和玉米赤霉烯酮-HRP酶结合物竞争包被在测试孔的玉米赤霉烯酮抗体发生反应。孵育结束后洗板除去没有反应的试剂。加入底物显色剂、无色的底物转化为蓝色的产物;加入反应终止液后使颜色由蓝色变为黄色;在450nm波长进行检测,样品中的玉米赤霉烯酮浓度与吸收光强度成反比。

 

试剂盒组成

试剂盒保存在2-8摄氏度。在有效期内都可以使用

196孔酶标板:1块(12×8条)。分析测试百科网w~i+L8e?6F
2
、标准液(Standard: 5瓶(2ml/瓶),浓度分别为
0, 20, 50, 250,1000 ppb(注意:因为谷物样品在萃取过程中125倍稀释,标准品实际上为设定标准浓度的1/25,所以原样品的浓度无需校正)

3HRP酶标记物:1瓶(25mlHRP标记的玉米赤霉烯酮酶结合物。

4、一块红色的混合板。

5底物显色液:1瓶(12ml)。

6、终止液:1瓶(12ml1N HCl)。

7、使用说明书。

操作步骤

注意:标准和样品做平行可以增加精密度和准确度

1、使用前将试剂盒和样品处理液提前从冰箱中拿出来使其达到室温。

2、从铝箔袋中拿出要求数量的微孔条,放入干燥剂并重新封好袋子以免微孔条受潮。

3、拿出同样数量的混合孔,把不用的放好。

4、在对应的混合孔中加入100μL的标准或样品,确保吸头要干净。

5、在每个混合孔中加入200μL酶结合物。

6、用排枪轻轻的吹吸45次把混合孔中的液体混匀,然后转移100μL混合板中的液体到测试孔。

7、孵育10分钟。

8孵育完成后,将微孔中的溶液倒入水槽中,用自来水加满微孔然后倒掉,重复四次,总共五次洗板。

9、最后一次清洗后拍板,去掉残留的洗液。

10、每个测试孔加入100μL底物。

11、孵育5分钟

12每个测试孔加入100μL终止液。

13450nm下读取每个孔的吸光度值(OD

结果分析

1、半定量结果的判定,可根据样品的吸光度值与标准的吸光度值来判定,样品的吸光度值低于某个标准的吸光度值,则说明样品的玉米赤霉烯酮含量大于此标准的浓度,样品的吸光度值高于某个标准的吸光度值,则说明样品的玉米赤霉烯酮含量小于此标准的浓度。

 

2、定量结果判定,需要以标准的吸光度值为X轴,标准浓度的对数为Y轴绘制曲线图,将标准浓度吸光度值的点用直线连接,样品的吸光度值也位于这条直线上,根据样品的吸光度值在Y轴上即可找到相应样品的浓度,如果样品的吸光度值大于最小标准的吸光度值或小于最大标准的吸光度值,即可说明此样品中玉米赤霉烯酮的含量小于0.02ppm或大于1ppm

 

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