上海恒远生物科技有限公司主营产品:ELISA试剂盒,免疫组化试剂盒,放免试剂盒,标准品,血清,抗体,培养基,生物试剂等,公司秉承“专注品质、信守承诺、积极沟通、创新服务”的企业文化积极参与生物领域的技术创新和技术服务,力求为我国科研事业添砖加瓦。021-60521817 60515410。

人5羟色胺(5-HT)的操作步骤

上一篇 / 下一篇  2011-03-07 10:21:33

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1.        标准品的稀释:人5羟色胺(5-HT)试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2400ng/L

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

1200ng/L

4号标准品

150μl5号标准品加入150μl标准品稀释液

600ng/L

3号标准品

150μl4号标准品加入150μl标准品稀释液

300ng/L

2号标准品

150μl3号标准品加入150μl标准品稀释液

150ng/L

1号标准品

150μl2号标准品加入150μl标准品稀释液

 

2.        加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.        温育:用封板膜封板后置37温育30分钟。  

4.        配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5.        洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.        加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.        温育:操作同3

8.        洗涤:操作同5

9.        显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37避光显色15分钟.

10.    终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.    测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。


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