蛋白质分子量测定
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下一篇 2008-08-01 15:11:55/ 个人分类:蛋白质(多肽)药物理化分析
方法:质谱法
原理:蛋白质分子离子化后通过质量分析器对其质荷比进行分析,或进一步通过算法(如高斯算法)得到样品的精确分子量。
仪器:BrukerAutoflex Ⅱ(MALDI-TOF-TOF-MS)
样品要求:
含盐量:挥发性无机盐<20mM;不挥发性无机盐<5mM
样品蛋白质总含量>50pmol;纯度>90%
样品应尽量保持其纯度,不要添加任何保护剂或其他物质
实例分析:
大分子量样品的分子量测试分析:
样品理论分子量:67680Da
图谱解析:根据图谱得到的分子量为67695.3893Da
常见影响测试的情况:
1. 含盐或其他杂质的量过高。
2. 蛋白质纯度不足。
3. 蛋白质本身特性(如糖基化)造成难以离子化,测试无结果。
4. 分子量超出测量范围(太大或太小)。
5. 有杂蛋白污染。
6. 原蛋白质发生了降解。
7. 样品量太少
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TAG: 蛋白分子量