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DyLight荧光二抗——高性价比的全新荧光体验

上一篇 / 下一篇  2011-05-23 16:21:23 / 个人分类:细胞因子

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DyLight™系列荧 光标记是一种近年来被广泛应用的新型荧光染料,由于具有很好的光谱宽度、更强的荧光强度,更高的光学耐受性(抗淬灭性)、对pH不敏感、分子较小而渗透性更好的优势,越来越受到科研客户的喜爱。DyLight™种类齐全,如Dylight 405是蓝色荧光,替代Alexa 405;DyLight 549是绿色荧光,可完全替代FITC/Cy2/Alexa 488;完全替代Cy3/Rhodamin/Alexa 546/Alexa 555的Dylight 549;替代Texas Red/Alexa 594的Dylight 594;Dylight 633和Dylight 649(可替代Cy5/Alexa 647)则是更强的红色荧光;另外,Dylight还有适配Odyssey系统的近红外和远红外二抗Dylight 680和DyLight 800。下面我们来看看DyLight系列荧光的优异表现吧:

 

一、DyLight荧光二抗比传统荧光标记二抗具有更高的荧光发光强度

dylight-488-alexa-fitc.gif dylight-549-cy3-alexa-555.gif

 DyLight 488标记的抗体比Cy2 和FITC标记的更亮,与Alexa Fluor 488 标记的亮度相当。DyLight 549标记的抗体比传统的罗丹明、TRITC等荧光亮,与Cy3 和Alexa Fluor 555亮度相当;而DyLight 594标记的抗体荧光亮度明显强于Alexa 594标记抗体。相比较Texas Red而言,不仅更亮,而且具有更好的水溶性。

 

二、DyLight荧光二抗比传统荧光及Alexa标记二抗具有更低的背景!

dylight-488-alexa-fitc1.jpgdylight-649-flow.gif

左上图为使用 FACSCalibur流式细胞仪(Becton Dickinson),分析抗-CD3和其他荧光素标记的人外周血淋巴细胞图谱。不同颜色分别指示DyLight 488 (绿色)、FITC (黄色)、Cy2 (蓝色)以及Alexa Fluor 488(红色)标记的荧光二抗。箭头所指处显示Alexa Fluor 488在这个实验中有轻微的背景。右上图为在流式分析中,以抗-CD3和各种荧光素连接二抗标记的人外周血淋巴细胞图谱。绿色为DyLight 649、黄色为APC、蓝色为Cy5 标记的二抗。Alexa Fluor 647为红色区域。箭头所指处显示Alexa Fluor 647在这个实验中有轻微的背景。

DyLight荧光二抗种类更多更全

dylight-list.jpg从蓝色的DyLight 405、绿色的DyLight 488、黄色的DyLight 549、橙色的DyLight 594到红色的DyLight 633和DyLight 649等最常用的荧光颜色,激发光和发射光光谱分布合理,适用于各种荧光分析。其中蓝色荧光的DyLight 405适合用于绿色和红色以外的三标实验。

另外,还有两种远红外DyLight标记抗体,具有更低的荧光背景干扰和更强的样本穿透力,因而更适用于细胞或组织的成像等领域的研究。艾美捷提供的进口DyLight抗体产品覆盖各种动物种属,包括人、小鼠、兔、大鼠等,另有3种标记的链亲和素。


四、DyLight荧光二抗具有最高的性价比!

 可能还需要考虑的一个问题是价格的问题,其实Dylight的荧光二抗与常规荧光二抗相比,具有更高的性价比,一般来说,Dylight的价格比常规二抗只高20%左右,但是Dylight的效价通常是常规荧光二抗的2-4倍左右,因此就最终的性价比,Dylight更胜一筹。举例来说,EarthOx的 FITC标记的山羊抗小鼠IgG二抗(货号为E031210),100μl是¥160;而相应的EarthOx的Dylight 488标记的山羊抗小鼠IgG二抗(货号为E032210),100μl报价是¥240,但是在具体使用时,比如免疫荧光实验,其推荐稀释比率分别为 1:100和1:400,即100μl的FITC标记山羊抗小鼠IgG二抗(货号为E031210)最终使用液是10ml,而100μl的Dylight 488标记山羊抗小鼠IgG二抗(货号为E032210)最终使用液是40ml,可见,即使不考虑Dylight更高的荧光强度、更好的光学稳定性和特异性,但就价格来说,Dylight荧光二抗也具有更高的性价比。

五、DyLight荧光二抗比传统荧光标记二抗具有更好的光学稳定性、发光更持久、更适合拍照

dylight-488-alexa-fitc2.jpgdylight-549-1.jpgdylight-594-1.jpg

从光稳定性上来说,DyLight 488与Alexa 488均表现优异,均强于FITC和Cy2;DyLight 549与Alexa 555具有相当的耐光性,稍微比Cy3强。在封片剂中加入抗淬灭剂如ProLong Gold、VECTASHIELD或含N-propyl gallate的PBS-甘油等可增加这三种荧光染料的耐光性;在可见光谱的橙-红区域内,DyLight 549和Cy3标记的二抗在所有免疫荧光实验中表现出最大灵敏度。DyLight 594在不含有抗淬灭剂的条件下,远较Texas Red稳定,与Alexa594相当;在含有某些抗淬灭剂的情况下,DyLight 594同样表现优异。

 

我们向您推荐美国EarthOx原装进口的液体形式的小包装常用DyLight系列二抗产品,以及Jackson各种规格的全系列DyLight二抗产品。

 

小包装EarthOx的DyLight荧光二抗均提供100μl和500μl两种包装现货产品。EarthOx是美国专业生产免疫试剂并提供细胞学研究解决方案的公司,其产品主要销往到全球的的大学、科研院所等研究机构。其中EarthOx为您提供 最常用的DyLight 549荧光标记二抗产品:

 

 

抗体描述货号|荧光标记

DyLight 405

400nm/421nm

DyLight 488

493nm/518nm

DyLight 549

555nm/568nm

DyLight 594

591nm/616nm

DyLight 649

652nm/670nm

Goat Anti-Mouse IgG (H+L)

E032110

E032210

E032310 

E032410

E032610

Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)

E032120

E032220

E032320

E032420

E032620

Rabbit Anti-Goat IgG (H+L)

E032130

E032230

E032330

E032430

E032630

Goat Anti-Rat IgG (H+L)

E032140

E032240

E032340

E032440

E032640

Goat Anti-Human IgG (H+L)

E032150

E032250

E032350

E032450

E032650

注:每种规格均提供100μl和500μl,2011年报价分别为¥240/¥960,最新报价请使用货号在网站内查询。

 

大包装DyLight二抗更划算、种类更多!

 

 

1.大包装二抗种类更齐全、应用更广泛。更重要的是,JacksonDyLight系列种类非常多,几乎能满足实验的各种需求,包括经过各种血清吸附、不同种属来源(包括驴、兔、山羊、小鼠等)、F(ab’)2Fab等不同片段化,以及特异性抗IgM/IgA或者抗FabFc二抗产品。下列为部分DyLight二抗列表,更多相关产品及解决方案请联系艾美捷科技有限公司。
 

 2大包装二抗具有更高的性价比。以DyLight488山羊抗小鼠二抗为例,Jackson的(货号为115-485-003)规格为2mg,可配制成1.3ml,与EarthOx的相应二抗相比,是其100μl包装价格的6倍,含量却增加了12倍!另外,由于DyLight荧光二抗本身分子量较小,同一个二抗分子上可以标记更多的DyLight荧光物,比如与相同规格的FITC山羊抗小鼠二抗(货号为115-095-003)相比,价格虽然增加了25%,效价却高了100%!这还没有考虑DyLight具有更好的抗萃灭性、灵敏度以及信噪比!jackson-dylight.gif

*标有“(min X…Prot)”字样的抗体是经过了圆括号中所标的物种的IgG/或血清蛋白的吸附处理的二抗。与一个物种反应的二抗可能与其他物种发生交叉反应,除非这类抗体经过其他物种的吸收实验。而经过了相关物种的血清蛋白吸附便可以降低与该物种的IgG的非特异性结合能力。但是需要注意的是,这种经过针对物种吸附处理的抗体识别相近物种单抗的表位数量也减小了,其识别单抗的能力也很弱。

 

# 这种F(ab’)2片段形式的二抗是用胃蛋白酶消化IgG去除Fc部分,剩下两个靠二硫键连接的结合抗原的Fab部分,依然是二价的;该抗体可避免与Protein A /G或与Fc受体的结合, 还由于其分子本身比较好,更容易渗透入细胞组织结构内而灵敏度更高 。

 

 

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