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FITC荧光二抗是什么?

上一篇 / 下一篇  2011-05-23 16:23:37

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  FITC(Fluorescein Isothiocyanate,异硫氰酸荧光素)是一种绿色荧光团,在免疫学实验里,经常被用于荧光团标记到相应的检测分子,如抗体上。FITC的纯品为黄色或橙黄色结晶粉末,易溶于水和酒精溶剂。FITC分子量为389.4,最大吸收光波长为 490~495nm,最大发射光波长为520~530nm,呈现明亮的黄绿色荧光。FITC在冷暗干燥处可保存多年,是目前应用最广泛的荧光素。由于FITC是小分子化合物,每一个抗体可标记几个FITC分子,IgM通常用小分子的荧光素标记,如FITC、Cy3/5、Texas Red等。

Dylight荧光二抗      

     我们知道,FITC的绿色荧光强度肉眼观察已经很亮了,但是从上面的图可见,与Cy2相比还是偏弱,而DyLight 488则更胜一筹。DyLight是一种新型的荧光分子,与传统的荧光团如FITC、Rhodamine、Texas Red等相比,具有更强的荧光强度、更高的光学稳定性以及特异性等。同时,DyLight种类齐全,如Dylight 405就是蓝色荧光,Dylight 488是绿色荧光,可完全替代FITC;完全替代Cy3和Rhodamin的Dylight 549;替代Texas Red的Dylight 594;Dylight 633和Dylight 649则是更强的红色荧光;另外,Dylight还有适配Odyssey系统的近红外和远红外二抗,分别是Dylight 680和DyLight 800。

dylight-2.jpg

 

    FITC本身性质稳定,能与蛋白质结合,是检测组织细胞内蛋白质最常用的荧光探针。它还能标记抗体,可用于免疫组织化学单染或多重染色。FITC荧光二抗主要优点是人眼对黄绿色较为敏感,通常切片标本中的绿色荧光少于红色。缺点是在光照下 易淬灭,易受自发荧光影响。实际上,FITC的最大缺点是淬灭快,因此要和抗淬灭剂一起使用。DyLight 488则完全不一样,如右图所示,不同荧光团在含有抗淬灭剂(90%甘油的PBS)里的荧光淬灭情况,由图可见。FITC的淬灭最快,Cy2其次,而Dylight 488和Alexa 488都具有很好的光稳定性。因此DyLigt非常适合荧光拍照。那么Dylight到底是一种什么样的荧光团?不管在结构以及功能和应用上,Dylight都是一种新的荧光团,与传统的荧光团相比,其分子量相对较小, 因此一个大分子上可以标记更多的Dylight,同时单个的Dylight荧光团,其荧光强度更强,特异性更好;Dylight对光更稳定,这意味着其具 有更高的抗淬灭性,不像FITC因为快速发生淬灭而无法及时捕捉到荧光图像。

    可能还需要考虑的一个问题是价格的问题,其实Dylight的荧光二抗与常规荧光二抗相比,具有更高的性价比,一般来说,Dylight的价格比常规二抗 只高50%左右,但是Dylight的效价通常是常规荧光二抗的2-4倍左右,因此就最终的性价比,Dylight更胜一筹。举例来说,EarthOx的 FITC标记的山羊抗小鼠IgG二抗(货号为E031210),100μl和500μl报价分别是¥160和¥640;而相应的EarthOx的 Dylight 488标记的山羊抗小鼠IgG二抗(货号为E032210),100μl和500μl报价分别是¥240和¥960,但是在具体使用时,比如免疫荧光实 验,其推荐稀释比率分别为1:100和1:400,即100μl和500μl的FITC标记山羊抗小鼠IgG二抗(货号为E031210)最终使用液是 10ml和50ml,而100μl和500μl的Dylight 488标记山羊抗小鼠IgG二抗(货号为E032210)最终使用液是40ml和200ml,可见,即使不考虑Dylight更高的荧光强度、更好的光学 稳定性和特异性,但就价格来说,Dylight荧光二抗也具有更高的性价比。下图为EarthOx原装进口DyLight 488标记,针对不同种属的二抗产品,艾美捷均提供现货包装:

中英文品名品牌货号规格详情
  DyLight 488 AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG(H+L)  EarthOx  E032210  ¥240/100μl   ¥960/500μl详情
  DyLight 488 AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG(H+L)  EarthOx  E032220  ¥240/100μl   ¥960/500μl详情
  DyLight 488 AffiniPure Rabbit Anti-Goat IgG(H+L)  EarthOx  E032230  ¥240/100μl   ¥960/500μl详情
  DyLight 488 AffiniPure Goat Anti-Rat IgG(H+L)  EarthOx  E032240  ¥240/100μl   ¥960/500μl详情

     作为多家国际知名品牌的中国或区域代理,艾美捷能为您提供全系列的Dylight原装进口荧光二抗,包括Jackson、KPL的大包装粉末形式的Dylight荧光二抗,另外,也提供EarthOx的小包装液体形式Dylight荧光二抗,均具有很高的性价比。针对荧光标记二抗,有FITC、 TRITC、Rhodamine、PE、Cy3/5、AMCA、Dylight等多种荧光标记二抗;按照检测物种分,有抗 人、大鼠、小鼠、猪、驴、绵羊、山羊、小鸡、马、兔、仓鼠、狗、牛,以及多种细菌类二抗;另外,还有IgG、IgA、IgM以及IgG(Fc)、 IgG(ab’)2等不同类型抗体。如果您对上述产品感兴趣,请随时与艾美捷联系。

 

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