一株气单胞菌属高酶活角蛋白酶生产菌的分离与鉴定

一株气单胞菌属高酶活角蛋白酶生产菌的分离与鉴定
齐清文  张光祥*  冯婷  赖思思  黄才琴  李维
(四川师范大学生命科学学院  四川 成都  610101)

摘  要: 并非所有气单胞菌属(Aeromonas)细菌都是致病菌, 近年来气单胞菌功能利用方面的研究取得了一些重要进展。用微生物降解法对废弃羽毛加以有效利用, 既可变废为宝又符合低碳环保的要求, 更多分泌高酶活角蛋白酶的新菌种资源的筛选与功能鉴定, 将有助于微生物降解法中降解不彻底和速度慢等难题的解决。以半腐烂羽毛为材料, 先后通过羽毛粉和酪蛋白选择培养基的反复初筛和复筛、羽毛发酵液酶活测定等筛选出相对酶活最高的菌株, 并按常规方法进行分类学鉴定和生长特性分析。经初筛和复筛得到的19个菌株中, FD41的羽毛发酵液相对酶活最高, 达3.864 U/OD600。根据FD41菌株的16S rDNA序列比对、形态特征、革兰氏染色和糖发酵试验等结果, FD41鉴定为气单胞菌属细菌, 这是首次报道产高酶活角蛋白酶的气单胞菌菌株。研究发现接种量和菌株的不同都是影响培养液中菌体细胞增殖特性的重要因素, 并且发酵液酶活受菌体繁殖量的影响很大, 故提出在相同培养条件下按酶活大小筛选菌种时, 应使用均一化的菌种接种量并以相对酶活为比较指标。
关键词: 羽毛降解菌, 角蛋白酶, 相对酶活, 气单胞菌FD41