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DNS比色法测定还原糖和总糖

上一篇 / 下一篇  2011-04-08 14:29:02

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  还原糖和总糖的测定

  (3,5-二硝基水杨酸比色法)

  一、实验目的

  1、掌握还原糖和总糖测定的基本原理

  2、学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用

  二、实验原理

  还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。

  还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类。单糖都是还原糖,双糖和多糖不一定是还原糖,例如乳糖和麦芽糖是还原糖,蔗糖和淀粉是非还原糖。利用各种糖的溶解度不同,可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来。对非还原性的双糖和多糖,可用酸水解法使其降解成还原性单糖进行测定,再分别求出样品中还原糖和总糖的含量(常以葡萄糖含量计)。

  还原糖在碱性条件下加热可被氧化成糖酸及其它产物,而氧化剂3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内,还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系,利用分光光度计在540nm波长下测定光密度值,查对标准曲线并计算,便可求出样品中还原糖和总糖的含量。由于多糖水解为单糖时,每断裂一个糖苷键需加入一分子水,所以在计算多糖含量时应乘以系数0.9。




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