Biacore单抗药物与FcRn受体互作分析指南

FcRn是一种IgG 受体,主要通过结合和介导IgG和白蛋白的跨屏障转运,从而延长IgG在血液中的半衰期。因此,FcRn与IgG的亲和力和动力学数据常用于表征抗体药物的代谢水平。Biacore作为检测分子相互作用的金标准常用于检测Fc受体和IgG之间的亲合力及动力学。

虽然Biacore检测Fc受体和IgG相互作用已经具有较成熟的方法,但对初次接触Biacore仪器的实验操作人员,完成Fc受体和抗体检测需要一定的时间和精力。因此我们推出了一系列Fc受体和抗体相互作用检测的操作指南。

操作流程步骤如下:

1. 样品、实验耗材准备阶段

实验耗材准备阶段不仅推荐了此次实验主要耗材NTA芯片和试剂盒,以及其他试剂和耗材的货号和厂商,方便用户参考。还提供了FcRn的参考购买来源,IgG样品的好坏的判断标准,此外还对盐离子过高或者糖浓度过高的样品给出了处理方法。

2. 开机

对于初次接触Biacore T200仪器的客户,可以轻松的通过这一部分的内容介绍了解Biacore T200的开机操作流程和注意事项,也可以将这部分的内容贯穿在其他的Biacore检测实验中。

3. 样品配置

FcRn和IgG的配置稀释已根据以前实验结果给出了具体的浓度和要求,需要做FcRn和IgG相互作用的实验人员已无需对样品的浓度和缓冲液的条件进行摸索。

4. 实验方法设定和样品检测

实验方法的设定常常需要对实验条件方法进行摸索,本方法不但给出了摸索的具体步骤而且已给出了相关的实验条件可以直接在Biacore Control software 上进行操作。

5. 数据分析针

对FcRn和IgG的检测数据,我们给出了利用Biacore Evaluation software的具体分析步骤以及数据好坏的判断标准。

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