海能仪器：猪和牛脂肪中孕酮残留量的测定（液相色谱法）

醋酸美仑孕酮、醋酸氯地孕酮和醋酸甲地孕酮为合成的孕激素类药物，有明显的孕激素和抗雄激素作用，可抑制排卵。孕激素对垂体促性腺激素的释放有一定的抑制作用，动物实验表明有死胎率增加和致畸作用，副作用有：（１）恶心、头晕、倦怠；（２）突破性出血；（３）孕期服用，会增加女性后代的男性化作用。孕激素类药物能增强体内物质沉积和改善生产性能，可以很快产生显著和直接的经济效益，因此，对生产者有很大的吸引力。畜牧业中使用孕激素类药物（非治疗用途）已有很长的历史，但人类长期食用含有激素的肉制食品，即使含量甚微，亦会明显影响机体的激素平衡，而且有致癌危险，对幼儿造成发育异常等危害。因此，开发一种能检测孕酮残留量的方法是十分必要的。本文采用高效液相色谱法对牛和猪脂肪样品中的孕酮进行检测.

1　试剂与仪器

1．1　试剂　醋酸美仑孕酮、醋酸氯地孕酮和醋酸甲地孕酮标准品，乙腈，甲醇，乙酸乙酯，其他试剂为分析纯。水由净化系统制得。

　　（１）标准储备液：１０００μｇ／ｍｌ，分别准确称取0.05ｇ 醋酸美仑孕酮、醋酸氯地孕酮和醋酸甲地孕酮标准品于５０ｍｌ容量瓶中，用甲醇定容。于４℃保存，可使用一年。

　　（２）混合中间溶液Ｉ：１００μｇ／ｍｌ，分别吸取10.0ｍｌ 醋酸美仑孕酮、醋酸氯地孕酮和醋酸甲地孕酮标准储备液于１００ｍｌ 容量瓶中，用甲醇定容。于４℃保存，可使用一年。

　　（３）混合中间溶液ＩＩ：１．０μｇ／ｍｌ，取１．００ｍｌ 混合中间溶液Ｉ于１００ｍｌ 容量瓶中，用甲醇定容。于４℃保存，可使用半年。

（４）混合标准工作液：分别吸取１０、２０、４０、８０、１００μｌ 混合中间溶液ＩＩ 添加到９８０、９７０、９５０、９１０、８９０μｌ 的乙腈－水（６５：３５）中，再加入１０μｌ ０．２％盐酸溶液，混匀，得到浓度为０．０１０μｇ／ｍｌ、０．０２０μｇ／ｍｌ、０．０４０μｇ／ｍｌ、０．０８０μｇ／ｍｌ 和０．１０μｇ／ｍｌ 混合标准工作液，供液相色谱测定，当日使用。

1．2　仪器　LC7000 液相色谱系统，LC7011泵体，LC7020 紫外－可见检测器，Hanon-Clarity色谱软件。氮吹仪；海能全自动固相萃取装置；低温离心机；涡旋混匀器；ＣＮ 固相萃取柱。