第一届“协和杯”案例大赛精选案例分享（5）

由北京协和医院检验科、ChiCAST学会主办，北京毅新博创生物科技有限公司、检验医学网、MiR医学仪器与试剂及小桔灯网协办的第一届“协和杯”基于临床质谱的应用案例大赛开展以来，小编收到了非常多的优秀案例，前几期我们为大家分享的优秀案例都得到了广泛好评，本期我们将继续为大家分享优秀作品，本期分享的是由西安市中心医院检验科高越老师带来的作品《应用MALDI-TOF MS鉴定活泼胃球菌血流感染1例报道》，各位读者喜欢这个作品的话，可以

案例展示

第一部分：病例描述

患者，男，80岁，主诉上腹部疼痛10余天，加重4小时，2021年01月11日急诊以“胆总管结石伴急性胆管炎”收住入院。当日患者体温最高37.5℃，伴寒战一次，抽取血培养，考虑为急性胆管炎引起，并给与抗感染治疗。

辅助检查：血常规白细胞18.57×109/L，中性粒细胞百分比97.7%，降钙素原：6.15 ng/ml。

第二部分：

菌株鉴定、病原体检测、血清多肽图谱等质谱操作过程

将血培养瓶置于BD BACTEC 血培养系统进行培养，血培养中厌氧血培养瓶孵育9 h后报阳性，需氧血培养瓶培养5 d后报阴性。抽取阳性血培养液分别转种于2块哥伦比亚血琼脂平板和2块巧克力血琼脂平板（不加万古霉素）并取1块哥伦比亚血琼脂平板和1块巧克力血琼脂平板（不加万古霉素）放入厌氧产气袋进行厌氧培养，另外2块平板放入35℃、5% CO2培养箱中孵育。

培养48h后，需氧环境下的血琼脂平板及巧克力平板未见细菌生长，厌氧环境下的血琼脂平板及巧克力平板均长出灰白色菌落，挑取单个菌落涂片固定，进行革兰染色镜检，油镜下观察结果如图1所示：可见均匀分布的革兰染色阳性及阴性球菌，未见特殊排列方式。

图1

再用一次性接种环挑取单个菌落直接涂布至金属靶板，加入基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOFMS）系统Clin-TOF微生物前处理试剂盒中的配套基质液（基质I液和基质II液）各1 uL直至自然干燥，将金属靶板放入质谱仪进行鉴定，鉴定结果为活泼胃球菌（Ruminococcus gnavus），置信度为65.38。

第三部分：质谱检测结果

病例分析

（1）活泼瘤胃球菌：革兰染色阳性球菌，但革兰染色不定，厌氧环境培养48 h后，纯菌落革兰染色镜下可见大量均匀分布的阴性球菌，未见特殊排列方式。

（2）国内外有研究表明活泼瘤胃球菌在IBD（炎症性肠病）患者体内显著增加，且与疾病活动性有关。而此病例提示我们需进一步关注胃肠道炎症易导致相应部位定植菌入血，加重病情进展，特别是抵抗力较低的老年人。目前在临床上我们已经关注到某些致病菌易定植，但也应关注某些定植菌的致病性，而其致病机理还需要大量研究。

（3）在本病例中，患者入院后根据情况及时抽取血培养，9 h后血培养报警厌氧瓶阳性，培养液厌氧环境培养48 h，经过MALDI-TOF MS快速鉴定，及时明确病原菌，给予临床治疗极大帮助。

方法技术支持

（1）近年来，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI—TOF MS)已被报道可用于直接鉴定血培养标本中的病原菌，为临床微生物检验提供了一种高效便捷的手段。有研究报道血培养阳性病原菌中绝大部分为兼性厌氧菌，专性厌氧菌的构成比为1％～17％。因此，早期准确地鉴定出厌氧菌，提高兼性及专性厌氧菌的阳性检出率，帮助临床采取正确诊疗措施，降低患者疾病负担等非常重要。

（2）本实验室采用北京毅新博创质谱仪及其配套试剂，在有限的条件下极大提高了本室病原菌检出率，特别是临床少见菌（如厌氧菌），以及形态不典型的致病菌等。因此MALDI—TOF MS具有高敏感度和高准确度，操作简单，成本低等一些列优点，值得在临床推广使用。

第四部分：鉴别诊断

（1）消化性溃疡：疼痛为与饮食有关的规律性疼痛，周期性上腹疼痛，呕吐后疼痛可缓解，行胃镜检查可明确诊断。

（2）胰腺炎：疼痛为持续性上腹部束带样疼痛，阵发性加剧，呕吐后疼痛不缓解，伴淀粉酶升高，行腹部CT检查可明确诊断。

另外，我们第一届“协和杯”案例大赛投稿正在进行中，对于最后优胜的选手，我们会提供丰厚的奖品，欢迎各医疗机构临床、检验人员积极踊跃参赛。

欢迎提交您的临床飞行时间质谱作品，参赛方式：