蛋白样品鉴定过程一般只会使用Trypsin对蛋白进行酶切，鉴定到的肽段覆盖率大概在60%。为了得到靶蛋白的全部序列信息，百泰派克公司会选用在蛋白鉴定过程中常用的6种蛋白酶（Trypsin、Chymotrypsin、Asp-N、Glu-C、Lys-C和Lys-N）分别对靶蛋白进行酶切和鉴定，在得到更多的碎裂肽段片段的同时，经过肽段之间的拼接完成蛋白序列100%的测定。百泰派克公司应用现有的质谱技术平台，提供出以LC-MS/MS为基础的的肽谱图分析，此分析可以用于确认重组蛋白是否得到完整表达，检测重组蛋白表达过程是否发生断裂。主要用于蛋白质一级结构的确认，通过使用多种蛋白质酶切反应和液质联用技术对肽段的测序，结合专有的分析软件，能对任何非特异性蛋白酶酶解产物的质谱数据进行分析。从而实现对所测定靶蛋白序列100%的覆盖。

质谱法肽段覆盖率/肽谱图全序列测定的流程：

• 首先使用6种蛋白酶（Trypsin、Chymotrypsin、Asp-N、Glu-C、Lys-C和Lys-N）分别对靶蛋白进行酶切和鉴定
• 接着使用nano LC-MS/MS或者UV LC-MS/MS 对样品进行分析
• 将得到的肽段覆盖率/肽谱图全序列与您提供的理论序列进行比对
• 得到比对结果

质谱法肽段覆盖率/肽谱图全序列测定的优点：

（1）特异性及非特异性蛋白质酶的组合，可实现对任何蛋白质（多肽）的鉴定达到100%的覆盖率。
（2）每个肽段的确认包括：1）基于样品的质量2）基于样品的MS/MS指纹图谱，所以比仅使用一级质谱进行测定更准确。

样品要求：

胶内样品和溶液样品均可以用来进行上述测序
样品纯度越高越好，建议超过80%的蛋白质
需要的靶蛋白样品量：10-20ug
蛋白质胶样品也可用于肽段覆盖率测定，但需对样品进行特殊的前处理。

案例分析：

蛋白样品100%序列验证服务

在实际的实验过程中，按照尽量提高效率和降低花费的原则，我们会首先对客户提供的理论序列进行分析，分析过程是按照几种不同的蛋白酶酶切位点进行肽段覆盖率的预测，假如可以仅仅通过3种蛋白酶酶切就可以100%的覆盖全序列，实际实验过程就会先用这3种蛋白酶进行酶切和后续的序列分析实验，这样可以有效的降低实验的成本。以下是之前项目的部分数据，该项目中客户按照理论序列表达抗体药物，一级序列需要进行验证，以证明表达得到的抗体与理论序列一致，部分实验数据展示如下：

结题报告中，我们会按照下图所示的方式给出肽段覆盖率的详细数据。

中/英文项目报告

在技术报告中，百泰派克会为您提供详细的中英文双语版技术报告，报告包括：

1. 实验步骤（中英文）
2. 相关的质谱参数（中英文）
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 生物药物肽段覆盖率信息

生物药物肽段覆盖率测定一站式服务

您只需下单-寄送样品
百泰派克一站式服务完成：样品处理-上机分析-数据分析-项目报告

肽段覆盖率/肽谱图分析信息由北京百泰派克生物科技有限公司为您提供，如您想了解更多关于肽段覆盖率/肽谱图分析报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途