高效液相色谱柱后衍生方法测定乳制品中皮革水解蛋白

摘要：
本文使用岛津氨基酸柱后衍生系统锂型分析柱，建立了24种氨基酸的高效液相色谱柱后衍生分析方法。5个不同浓度标准样品进样（10，50，100，250，1000 ug/uL），对于大多数目标物校准曲线相关系数可达0.9999；对于L(-)-羟脯氨酸，方法的检测限（S/N=3.3）为20 ug/L，定量限（S/N=10）为50 ug/L。连续7针进样（250 ug/L,10 uL）保留时间相对标准偏差为0.01－0.83%。市售某两种品牌牛奶样品检测结果表面均含有L-羟脯氨酸，为皮革水解蛋白阳性样品。

仪器：
Shimadzu 20A安捷伦柱后衍生系统。具体配置为：LC-20AD×2（衍生剂输液泵），LC-20AB（梯度洗脱输液泵），SIL－20AC（自动进样器），CTO-20AC（柱温箱），RF-10AXL（荧光检测器），CBM－20A（控制器），DGU-20A5（在线脱气机），FCV-11AL（流路选择阀）。工作站LCSolution。

结论：
本文采用岛津氨基酸柱后衍生系统锂型分析柱，建立了牛奶制品中24种氨基酸的高效液相色谱柱后衍生分析方法，该方法柱后衍生及样品测定为全自动完成，消除了柱前衍生不同操作人员引入的认为误差，大大简化了样品前处理步骤，节约了时间，是一种可靠快速的检测方法。本方法可以直接用于检测牛奶中24中氨基酸。推荐使用岛津生产的高质量流动相及反应试剂，在降低基线波动的同时提高了灵敏度。也可以自行配制衍生试剂，要注意配制衍生试剂所用的各种试剂尽可能纯度高，否则基线波动大。本法可给从事乳制品皮革水解蛋白非法添加检测的人员做参考。