技术指标:
微滴制备量:10,000,000个微滴/样品,8样品/芯片。
起始样本量:样品体积≤50uL,DNA总量≤100万拷贝。
灵敏度:低至0.0001%。
样品类型:基因组DNA、新鲜组织、冰冻组织以及石蜡包埋组织中的DNA和cDNA、RNA;
“密闭管”设计确保PCR产物不暴露在空气中,减少了气溶胶污染和样品损失,精确定量样品中目标DNA。
同一样品zei高可进行10重检测,能够对多个不同丰度的靶基因进行精确定量。
检测通道:双通道荧光检测(VIC/FAM);
基本配置:
微滴制备设备RainDrop Source (P/N20-04401)(含配套PC工作站);
微滴荧光检测设备RainDrop Sense (P/N20-04402)(含配套PC工作站);
仪器控制软件;
配套微流体芯片耗材、配套试剂。
基于zl的RainStorm™ 微液滴(pico-droplet)
每个通道能将反应样本包埋在稳定的1000万个小油滴的反应体系并独立进行PCR反应
灵敏度低至1/1,000,000
比现有的PCR技术提高了1000倍的检测灵敏度
美国RainDacce
RainDrop™数字PCR(dPCR)系统----zei近一代的PCR技术
产品简介:
RainDrop™ 数字PCR(dPCR)系统可将反应体系无限稀释至1000万份,每个小液滴只有皮升级大小,因此系统在检测灵敏度、定量准确性、多重反应技术等方面都远远优于现有技术和同类产品。
基于系统的皮升级液滴技术,RainDrop™ 数字PCR系统可以实现目标分子的绝对定量,可应用于重要研究应用领域如低频肿瘤基因检测、基因表达谱和DNA拷贝数的绝对定量、SNP分析检测等方面,这从根本上提高了现有分子检测平台的性能。
产品特点及优势
灵敏度高
能够检出250,000个野生型分子中的 1 个突变,检测极限低至 1/1,000,000 。
多重反应, zei高可实现 10 重 PCR 分析:
采用单分子多色检测技术仅利用 VIC 和 FAM 两种荧光素,设置不同探针浓度可以对同一样品进行zei高达 10 重 PCR 检测。
灵活的反应设计
根据用户需要的灵敏度和待测基因数目需要来优化多重 PCR 反应的数量。
闭管设计
PCR 反应结束后,扩增产物不开盖检测,无需担心气溶胶污染,确保检测质量。
成熟的皮液滴技术平台
RainDrop™系统能够在半小时内高效均一地制备高达 1000 万个皮升大小的液滴。
成本低
可以对每个待测基因待测位点给出数字答案,实现单分子绝对定量,同等价位下产生的数据高出同类产品几个数量级。
精确的结果实现绝对定量
RainDrop ™ 系统将每种标记单一颜色( single-color-per-marker )的 PCR 模式转换成更加扩展且精确的每种标记多色且多强度( multi-multicolor and intensity-per-marker )的方法。这种新方法检测 1000 万个皮升大小的液滴内单分子 PCR 产物荧光信号,比现有方法灵敏度提高了 500-10,000 倍。由于每个信号代表一个分子,通过统计荧光信号类型、强度和液滴数量,研究人员可快速确定包含特定 DNA 目标的液滴的绝对数量,计算出不同待测基因的起始含量。
更高的检测灵敏度
为了评估 EGFR 突变的检测下限( LLOD ),将野生型 DNA 与不同浓度的突变体 DNA 混合,进行突变位点检测。在10,000,000 个液滴体系中,其中 250,000 个野生型分子中混入 1 个突变基因都能够被检测到,且稀释浓度与稀释次数成线性关系(R2 = 0.998 ),其 LLOD 为 1/1,000,000 (如图所示),这是根据突变体比野生型比率的平均值加 3 倍标准偏差所计算出来的。
前所未有的多重分析 dPCR
通过调整每个目的基因的探针浓度, Raindrop ™ 数字式 PCR 技术只用 VIC 和 FAM 两个荧光基团即可同时测定 4 个突变以及野生型基因,下图是进行 5 重 PCR 分析检测的分析图。通过调整反应条件,多重分析zei高可以扩充到 10 重,快速而有效地进行单个 DNA 样品中多个突变的检测、鉴定和测定。
简单的操作流程
RainDrop ™ 系统包括 Source— 样品制备系统和 Sense— 数据读取系统两部分。所有操作有仪器自动完成,研究者只需将PCR master mix 配好,无需其他操作,试验流程简洁方便。
Source 系统可以在 30min 时间里制备 1000 万个皮升大小的液滴 ( 包括 1 、 2 步操作步骤 ) ; Sense 系统可以在 3.5 hours 时间里将全部液滴进行荧光检测(包括 4.5 操作步骤)。
应用领域
Raindrop™ dPCR 技术通过荧光读值直接得出 DNA 分子的个数,是对起始样品的绝对定量,因此特别适用于传统 QPCR 依靠Ct 值不能很好分辨的应用领域:
拷贝数变异
突变检测
基因相对表达研究(如等位基因不平衡表达)
二代测序结果验证
miRNA 表达分析
单细胞基因表达分析
二、B0708-CMC15N7023质检总局检科院2015招标技术规格参考
国家质检总局 2014 年提升食品质量安全检(监)测能力建设专项 120 万元以上仪器设备采购项目
招标编号:B0708-CMC15N7023
4-1 检科院 数字 PCR 仪
1.主要用途
1.1 用于农产品食品成分定量检测、稀有突变检测、基因拷贝数检测、基因表达分析、SNP检测、食品中微生物定量。
2.工作条件
2.1 实验室环境温度范围:15-35℃
2.2 相对湿度:5-85%RH。
2.3 电源:AC 220V±10%,50Hz。
2.4 如产品达不到上述要求,投标人应注明其偏差。如仪器设备需要特殊工作条件(如电源、磁场强度、温度、湿度、振动强度等)投标人应在投标书中加以说明。
3.技术指标
3.1 微滴生成
*3.1.1 采用油包水乳液方式形成数字PCR技术体系。
#3.1.2 微滴数量和体积:将25微升反应体系分割成不少于1,000,000个体积小于0.01纳升的微滴,每个微滴独立进行PCR反应。
3.1.3 微滴稳定性:保证微滴在55个PCR循环后仍然保持稳定而不会彼此融合。
#3.1.4 内置微滴生成实时监控装置和软件,实时分析监控微滴生成和处理过程,确保微滴质量。
#3.1.5 配有纳米级微流体过滤器,可去除混入PCR反应体系的固体微粒。
#3.1.6 实验过程全自动,无需手动操作
3.2微滴分析
#3.2.1检测灵敏度:在SNP检测时,可从200,000个野生型中检测到1个突变型。
#3.2.2实现多重检测:使用单分子多色荧光检测技术,针对同一个样品可同时进行多于4重分析。
*3.2.3检测通道:可实现FAM、VIC双荧光同时检测,显示每个微滴 FAM通道和 VIC通道的荧光信号值;
#3.2.4在1,000,000个微滴/样本的条件下,每天zei多可检测24个样本。
3.2.5计算机软件提供图形用户界面实现仪器控制和操作。
#3.2.6 符合3B级标准的激光器
#3.2.7 正压系统控制进样
#3.2.8 行业标准FCS3.0数据输出模式可以可兼容流式细胞仪分析软
3.3耗材
#3.3.1 PCR反应试剂为开放系统,支持第三方PCR Master Mix制造厂商提供的试剂。
*3.3.2 扩增灵敏度:在微滴内初始只含1个靶分子时,可将靶分子扩增至检测所需浓度。
3.4 仪器整体系统
#3.4.1 单管中拷贝数检测zei大线性范围达106级。
#3.4.2 基因拷贝数检测精密度小于等于5%。
#3.4.3 整个实验流程为闭管设计,排除潜在污染和消耗,减少样品损失。
4.售后服务与培训
4.1 免费安装调试以及维护培训2次。
4.2 技术服务:故障报修响应不超过24小时,终身维修。
5.数量
5.1 1套
6.交货地点
6.1 中标人负责将产品运抵用户指定地点
7.交货期
*7.1 合同签订后3个月内。
8.保修期
*8.1 提供2年的整机免费保修(含服务费和工本费)。保修期自验收合格,双方签字之日起计算。保修期满前1个月由供方对仪器进行一次免费全面检查。如发现问题或潜在的问题,应在保修期内将问题解决。保修期内因质量问题而导致仪器停用的时间应从保修期中扣除。
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