MiSeq性能参数
MiSeq的规格
簇生成和测序
MiSeq Reagent Kit v2 | MiSeq Reagent Kit v3 | |||||
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读长 | 1 × 36 bp | 2 × 25 bp | 2 × 150 bp | 2 × 250 bp | 2 × 75 bp | 2 × 300 bp |
总时间* | ~4小时 | ~5.5小时 | ~24 小时 | ~39小时 | ~21小时 | ~56小时 |
产出 | 540–610 Mb | 750–850 Mb | 4.5–5.1 Gb | 7.5–8.5 Gb | 3.3–3.8 Gb | 13.2–15 Gb |
MiSeq Reagent Kit v2 Micro | MiSeq Reagent Kit v2 Nano | ||
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读长 | 2 × 150 bp | 2 × 250 bp | 2 × 150 bp |
总时间* | ~19小时 | ~28小时 | ~17小时 |
产出 | 1.2 Mb | 500 Mb | 300 Mb |
* 总时间包括MiSeq系统上双表面扫描所实现的簇生成、测序和碱基检出。
通过过滤的read**
MiSeq Reagent Kit v2 | MiSeq Reagent Kit v3 | MiSeq Reagent Kit v2 Micro | MiSeq Reagent Kit v2 Nano | |
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单端Read | 12–15 million | 22–25 million | 4 million | 1 million |
双端Read | 24–30 million | 44–50 million | 8 million | 2 million |
** 安装参数是基于在所支持的簇密度下运行Illumina PhiX对照文库 (对于V2版本,通过过滤的簇密度是865-965 k/mm2 ;对于V3版本,通过的簇密度是 1200-1400 k/mm2 )。根据样本类型、样本质量、通过过滤的簇的不同,真实的性能参数可能有所差异。
质量值†
MiSeq Reagent Kit v2 | MiSeq Reagent Kit v3 |
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在1 × 36 bp时,> 90%的碱基高于Q30 | 在2 × 75 bp时,> 85%的碱基高于Q30 |
在2 × 25 bp时,> 90%的碱基高于Q30 | 在2 × 300 bp时,> 70%的碱基高于Q30 |
在2 × 150 bp时,> 80%的碱基高于Q30 | |
在2 × 250 bp时,> 75%的碱基高于Q30 |
† 总时间包括NextSeq 500系统上双表面扫描所实现的簇生成、测序和碱基检出。
参考性能参数:
读长 | 上机时间 | 产量 | 质量 |
2×150bp | 24小时左右 | 4.5-5.1Gb | Q30>80% |
2×250bp | 39小时左右 | 7.5-8.5Gb | Q30>70% |
说明:
1、以上性能需要Miseq V2试剂进行测序。V1试剂仅支持2×150bp,上机时间27小时左右,产量1.5-2Gb,Q30>80%,目前已不再订购V1试剂。
2、该数据基于Illumina标准品PhiX(碱基分布均匀的DNA样品),推荐上机密度为950-1200K/mm2,PF后约880-965K/mm2。而不同的样品的测序结果会受到自身性质的影响。
参考招标参数:广州医科大学采购广医三院高水平大学建设项目(三)(0809-1741GZG12314)
分包4:高通量二代测序仪1台
1.一轮测序反应生成的有效数据量zei高可达15Gb(即150亿个碱基);
2.一轮测序反应生成的可读测序片段序列zei高可达2500万条;
3.支持读长高达 2×300 bp 的运行;
4.测序质量标准为Q30(即每个碱基的准确度为99.9%),并且75%以上的碱基比例达到Q30;
5.样本文库克隆扩增原理为桥式PCR法;
6.具备多重SNP分析功能,可在一轮实验中同时检测超过589,000个扩增子,(即384样品x1536扩增子/样本=589,824扩增子);
7.测序系统主机内置服务器,主机同时具备样本文库克隆扩增、测序和数据分析功能;无需油包水PCR;
8.可精确读取≥12个的连续重复碱基(如AAAAAAAAAAAAAAAA);
9.能符合上述指标的测序系统主机1套,包括了样本文库自动扩增和数据分析功能;仪器控制服务器配置:Intel Core i7-2710GE 2.10GHz CPU,16GB RAM,750G硬盘,采用Win7 Embedded Standard操作系统;无需再配置额外的分析服务器;
10.仪器同时具备并免费提供以下软件分析功能:全基因组重测序、定向重测序、癌症定向测序、定向富集测序、目标RNA表达测序、小基因组de novo测序、小RNA测序、16s宏基因组学研究、建库质量控制(QC)、小基因组转录组测序;支持云端分析;
11.开展完整的数据分析无需用户干预,从质量打分的碱基检出到变异体检出和比对所需时间小于3小时。
参考招标参数:北京市儿科研究所肿瘤分子研究平台建设项目 0733-166220900101
第 2 包:
新一代个人化测序仪
1.主要用途:未知物种全基因组测序,已知物种再测序,全基因表达组定量分析,全基因组小
RNA 分析,染色质免疫互沉淀(ChIP)研究,转录组分析,扩增子测序,定向重测序;
2.工作条件 :
2.1 温度:22℃±3℃;
2.2 湿度:20%-80%,非冷凝;
2.3 通风:zei大 1,364BTU/h;
3 技术指标 :
3.1 测序数据通量:每次运行可生成>70 亿(7G)以上碱基数据;
3.2 测序检测片段数量:每次运行可生成可读 2,000 万个以上片段序列;
3.3 测序实验时间:可以在 8 小时内完成样品制备、测序和数据分析,用于快速鉴定;
3.4 单端读取序列数据读长:不低于 200 碱基;
3.5 双端读取序列数据读长:不低于 2x200 碱基;
3.6 测序样品用量:DNA 样本需 1ug 或更低;
3.7 读取精度:原始数据准确性≥98%, 3 倍覆盖拼接序列准确性≥99.99%;
3.8 读取精度:可精确读取≥12 个连续单个重复碱基;
3.9 读取精度:测序结果 ≥Q30 的数据超过 80%;
3.10.扩增子测序:可同时进行 96 个样品的 1536 重位点的测序;
3.11.不同样品并行性:提供稳定成熟的 96 个样品的 index 混合接头;
3.12.样品制备:可在 2 小时内自动完成;
3.13.测序实验:扩增、测序和数据分析服务器在同一台仪器上完成;
3.14.提供生物信息学支持软件:如新物种拼接,小 RNA 分析,扩增子分析,转录组分析,
表达谱分析,自动去除 index 序列并分拆混合样品的数据等。
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