【求助】求快速破碎大量大肠杆菌的方法

最新回复

• ququer787 (2016-3-05 15:47:45)

  你的蛋白的稳定性怎么样？大量的话可以用冻融破碎，但是可能会引起蛋白的降解和失活，且速度较慢。
  我个人还是偏向于用超声裂解，虽说每次破碎量少，但是比较好控制，具体操作你可以看下这个：蛋白分离纯化之不同材料的预处理方法

• ujne (2016-3-05 15:48:09)

  高压均浆机（配备制冷系统）就可以了。

• yychen (2016-3-05 15:48:26)

  超声、溶菌酶、蛋白酶K都可以用
  超声根据仪器功率先做预实验，保证样品EP管不发热就可以了，尽量冰水浴下超声
  溶菌酶一般用量是5~10mg/ml差不多可以了，37度半小时，或者室温1.5小时，基本都化了。。。。
  蛋白酶K用量是20-50ug/ml，55度水浴0.5-1.5小时，也都化了。。。反正能用，超声速度快一点，但是有可能会把蛋白部分变性，因为局部温度会很高，关键自己控制。另外2个酶处理就是时间有点长。。。没啥副作用。

• ququer787 (2016-3-05 15:49:01)

  你的蛋白的稳定性怎么样？大量的话可以用冻融破碎，但是可能会引起蛋白的降解和失活，且速度较慢。
  我个人还是偏向于用超声裂解，虽说每次破碎量少，但是比较好控制，具体操作你可以看下这个：蛋白分离纯化之不同材 ...
  
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  这个文献能在哪找得到？

• ququer787 (2016-3-05 15:49:18)

  高压均浆机（配备制冷系统）就可以了
  
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  这个仪器一次性破碎量多大？效果怎么样？

• 3648755 (2016-3-05 15:49:43)

  这个文献能在哪找得到？...
  
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  cuturl('http://www.detaibio.com/topics/protein-purification-cailiaoyuchuli.html')
  

• ladyhuahua (2016-3-05 15:50:04)

  工业打法-----均质机    也叫高压匀浆机。多少量都给你破了。