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【求助】新柱子,峰分不开
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发表于: 2016-4-27 15:44 作者: SO2 来源: 分析测试百科网
查看完整版本请点击这里:
【求助】新柱子,峰分不开
安捷伦液相色谱,最近使用一根新柱子(GPC 柱子)分析新产品,为什么相邻两个峰分不开? 样品浓度或进样量 是不是对其有影响??应该降低还是升高?谢谢!
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【求助】新柱子,峰分不开
我也来说两句
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zzzz
(2016-4-27 15:45:01)
浓度影响是次要的,关键是流动相的问题,需要调整一下流动相各组分的比例或酸碱度
黄花菜
(2016-4-27 15:45:18)
浓度和进样量有影响的哦,小的浓度或小的进样量往往能获得好的峰形
zzzz
(2016-4-27 15:47:42)
再串联一个GPC柱,或许会好一些。
TNT
(2016-4-27 15:47:59)
调整一下流动相
555444
(2016-4-27 15:48:14)
请问一下你这是安捷伦什么型号的液相色谱仪,不同型号的有不同的做法。
SO2
(2016-4-27 15:48:34)
非常感谢大家对我的问题关注和回答~~!!需要补充的信息是:
1. 在另外一台同型号(安捷伦 1200LC)液相色谱上,分离条件相同,流动相也相同,得出的峰型就很好,能清晰地分开;
2. 使用的是相同的流动相;即单一流动相四氢呋喃,待测样品的溶剂也是四氢呋喃;
3. 在分离柱之前使用了保护柱;
4. 今天将样品浓度降低为原来的0.5倍,峰还是分不开:( 明天准备减小进样量再实验下;
请问,还应向哪些方面考虑?谢谢~~!!
INK
(2016-4-27 15:48:56)
看看色谱图和具体的分析条件为好。
您分析什么样品?
viviwang1987
(2016-4-27 15:49:16)
还是调流动相吧先。不行就换柱子。
555444
(2016-4-27 15:49:41)
这台仪器正常工作?
能否将两个仪器出来的图帖上,做一下对比?
SO2
(2016-4-27 15:50:06)
这是同一个样品在两台HPLC上的结果,柱子、分离条件等完全一样。不知道峰型为何相差那么多。。。。
是不是结果不好的那台因为柱外死体积过大?怎么解决这个问题呢??
谢谢~~
8princess8
(2016-4-27 15:51:57)
是同一根色谱柱么?
可能有死体积不同的问题,代换一下色谱柱前后的连接管路看看。
vvmmoy
(2016-4-27 15:52:45)
对的,尽量接短一点的管子。
8princess8
(2016-4-27 15:53:31)
检查一下管路连接,特别是柱子连接,小心又死体积
SO2
(2016-4-27 15:53:48)
因为分离柱前用了保护柱,两根柱子是放在上下两层的,在拐弯的地方感觉管线都被折掉了,所以我今天换了长些的管子重新连接在拐弯的地方自然弯曲,出的图还是老样子(同第二张图)。
柱子用PEEK管线连接,需要注意些什么能尽量减小死体积呢?
谢谢!
zbs
(2016-4-27 15:55:17)
管子的内径注意下
nn255
(2016-4-27 15:55:32)
那你是否试过把你旧的色谱柱放到那台不好的仪器上分析一下,然后再看结果,如果还是分不开的话那就是柱子的原因,看你的图,那张好的图分离效果也不是很好,也许你正好买到了稍差一点的色谱柱(每一根色谱柱都是有差异的),也就是说原来的比较好一点,建议你在流动相里加入适当组分的水,让峰的分离度大于1才算好的分离。
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【求助】新柱子,峰分不开
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zzzz (2016-4-27 15:45:01)
黄花菜 (2016-4-27 15:45:18)
zzzz (2016-4-27 15:47:42)
TNT (2016-4-27 15:47:59)
555444 (2016-4-27 15:48:14)
SO2 (2016-4-27 15:48:34)
1. 在另外一台同型号(安捷伦 1200LC)液相色谱上,分离条件相同,流动相也相同,得出的峰型就很好,能清晰地分开;
2. 使用的是相同的流动相;即单一流动相四氢呋喃,待测样品的溶剂也是四氢呋喃;
3. 在分离柱之前使用了保护柱;
4. 今天将样品浓度降低为原来的0.5倍,峰还是分不开:( 明天准备减小进样量再实验下;
请问,还应向哪些方面考虑?谢谢~~!!
INK (2016-4-27 15:48:56)
您分析什么样品?
viviwang1987 (2016-4-27 15:49:16)
555444 (2016-4-27 15:49:41)
能否将两个仪器出来的图帖上,做一下对比?
SO2 (2016-4-27 15:50:06)
是不是结果不好的那台因为柱外死体积过大?怎么解决这个问题呢??
谢谢~~
8princess8 (2016-4-27 15:51:57)
是同一根色谱柱么?
可能有死体积不同的问题,代换一下色谱柱前后的连接管路看看。
vvmmoy (2016-4-27 15:52:45)
8princess8 (2016-4-27 15:53:31)
SO2 (2016-4-27 15:53:48)
柱子用PEEK管线连接,需要注意些什么能尽量减小死体积呢?
谢谢!
zbs (2016-4-27 15:55:17)
nn255 (2016-4-27 15:55:32)
【求助】新柱子,峰分不开