【讨论帖】关于SDS电泳脱色的一种快速有效方法！

最新回复

• 00无名指00 (2013-10-11 11:21:07)

  
  相关疾病：
  普通感冒
  我是用乙醇-乙酸配成的脱色液,胶放入后微波加热10秒钟至微热,上摇床,10分钟后,倒掉,换新的脱色液重复一次,不超过半个小时也好了.关键是不用甲醇了,避免毒性.醋酸倒没什么,还防感冒呢

• mimili_901 (2013-10-11 11:21:30)

  
  那你的配方是什么？

• yes4 (2013-10-11 11:21:49)

  
  乙酸：乙醇：水=1：2：7

• wood533 (2013-10-11 11:22:08)

  用高温煮对你蛋白不会有影响吗？

• avi317 (2013-10-11 11:22:26)

  
  我们是直接用脱色液加热到60度左右,摇10min中,再换过新的脱色液同意超作.效果不错呀.

• tie8 (2013-10-11 11:22:51)

  关于“用高温煮对你蛋白不会有影响吗？ ”
  
  蛋白上样之前已经煮过了，所谓死猪不怕开水烫。
  而且SDSPAGE就是变性的条件。

• 7437654 (2013-10-11 11:23:18)

  QUOTE:

  原帖由 ukonptp 于 2013-10-11 11:20 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  PAGE胶染色完毕后，如果用一般的甲醇－乙酸脱色液进行脱色，一般至少需要2－3h，但是我们实验室一般都利用蒸馏水煮的方法：
  1.先将500ml蒸馏水放在一个干净的烧杯中，在电炉上煮沸。
  2.将染色好的胶用DD水冲净后放入煮沸的蒸馏水 ...

  我用过，好象效果不好呀！

• 49888 (2013-10-11 11:23:38)

  
  深圳国家生化中心有一种方法，不用醋酸和醇染色脱色，用的是什么我没试过，听说还不错，一点味道都没有，速度也快，感兴趣的不妨去他们网站去看看。我是用醋酸和乙醇脱色，就是电炉上煮，染色和脱色30分钟就可见结果

• nn255 (2013-10-11 11:23:58)

  
  还有人直接放在微波炉里呢

• vivian4123 (2013-10-11 11:24:16)

  
  我今天试用蒸馏水炮胶，并放在微波炉里加热，效果很好，而且速度快。
  
  前几天我还看到一个有关快速染色的帖子。方法是胶放在染色液里，并在微波炉煮沸，再摇三分钟即可看结果。效果似乎不是很理想，脱色后看到胶染色不均匀。不知道是不是因为染色业放少了，给蒸发了？
  
  另外我想问，用这种快速染色的方法。加热时甲醇，乙酸都已经蒸发了不少，这种染色业是否还可以重复利用。

• yonger (2013-10-11 11:24:40)

  加热脱色是比较快。
  另外，深圳国家生化中心的网站我去看了，没有发现关于此类帖子呀？

• summerxx (2013-10-11 11:25:01)

  前几天我还看到一个有关快速染色的帖子。方法是胶放在染色液里，并在微波炉煮沸，再摇三分钟即可看结果。
  
  是不是热染 用的R350啊？
  
  各位酶切的时候用什么脱色啊？本人都是用100mM NH4HCO3脱色，有时候也会放在37度水浴或者超声什么的，但是还是会有些顽固分子脱不掉色，郁闷。。。

• xingyi08 (2013-10-11 11:25:25)

  
  我用的是R250,这个没什么太大差别，只是染色物质不同而已。
  
  你说的酶切染色是什么意思？我用的这个脱色方法脱色非常完全。

• redbutterfly (2013-10-11 11:25:47)

  
  我们加入甲醇－乙酸脱色液后，将其直接放到微波炉里加热一分钟，然后放几张干净的tissue进去，能吸去很都染料，加快脱色，效果不错。

• flower@@ (2013-10-11 11:26:25)

  QUOTE:

  原帖由 redbutterfly 于 2013-10-11 11:25 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  我们加入甲醇－乙酸脱色液后，将其直接放到微波炉里加热一分钟，然后放几张干净的tissue进去，能吸去很都染料，加快脱色，效果不错。

  tissue的毛毛会不会粘在胶上影响做质谱啊？
  

• tangxin_80 (2013-10-11 11:26:50)

  
  把它叠成条状，沾在脱色皿边上就OK啦!(不要和胶混在一起）

• 66+77 (2013-10-11 11:27:12)

  
  就算和胶混在一起也没关系的，我做过，用的经典的老方法，脱色的时候，放入几张纸，脱色加快了。
  最近从同学那学到一种新的，至少对我而言是的，脱色液用的是0.5％mol/l的氯化钠，不但没有了刺鼻的怪味，脱色效果也不错。

• XYZQ (2013-10-11 11:27:38)

  用蒸馏水洗胶，并放在微波炉里加热，我们一直都在用，
  效果很好。
  只是要掌握好时间，时间太长而蛋白的含量又比较低的话，容易脱过了！

• xiaoxiaoniao (2013-10-11 11:27:57)

  
  "脱色液用的是0.5％mol/l的氯化钠"
  
  What does that mean? How to make it? Thanks!

• bgf5 (2013-10-11 11:28:16)

  
  对于蛋白质SDS电泳脱色，蛋白质性质有关，对于R-250着色强的蛋白质，采用经典方法、或加热方法都可以，如果着色差，都不好。