【求助】做westen blot 一抗使用多克隆抗体可以吗

字体: 小中大 | 打印发表于: 2013-10-07 16:57 作者: nvdabing 来源: 分析测试百科网

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lagua123 (2013-10-07 16:57:26)

QUOTE:
原帖由 nvdabing 于 2013-10-7 16:57 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

做westen blot 一抗使用多克隆抗体可以吗
可以的
nvdabing (2013-10-07 16:57:46)

和单克隆抗体有区别吗
lagua123 (2013-10-07 16:58:12)

QUOTE:
原帖由 nvdabing 于 2013-10-7 16:57 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
和单克隆抗体有区别吗
单抗表面的抗原决定簇单一，特异性强，条带单一，但条带信号弱；多抗，其上的抗原决定簇多样，特异性没那么强，非特异性条带多，出来的条带信号会比较强。
nvdabing (2013-10-07 16:59:00)

我担心多克隆抗体做出来的图不好看。
nvdabing (2013-10-07 16:59:24)

见了没，就是这种傻样，普通显影没有条带，加强以后，杂带都出来了，可就是目标条带没出来。。。所以我老板让我尽量订单克隆的抗体。。。这个上样量已经够高的了，75微克了。。。

81743654.snap.jpg
nvdabing (2013-10-07 16:59:40)

非常感谢，我现在手上有一篇文章做的是多克隆抗体的图片蛮好，不是你发来图片。我就打算订多克隆抗体了，幸好没订。谢谢了。
nvdabing (2013-10-07 17:00:00)

请问你使用的是鼠的还是兔的抗体，有区别吗
lagua123 (2013-10-07 17:00:44)

美女，请问你使用的是鼠的还是兔的抗体，有区别吗

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据我了解，鼠抗通常是单抗，兔抗通常是多抗，但是前天我去订抗体的时候，代理商说，也有兔抗是单抗的，不知道嗯，还不确定。。。
abc816 (2013-10-07 17:01:10)

据我了解，鼠抗通常是单抗，兔抗通常是多抗，但是前天我去订抗体的时候，代理商说，也有兔抗是单抗的，不知道嗯，还不确定。。。

========

有兔单抗
abc816 (2013-10-07 17:01:53)

见了没，就是这种傻样，普通显影没有条带，加强以后，杂带都出来了，可就是目标条带没出来。。。所以我老板让我尽量订单克隆的抗体。。。这个上样量已经够高的了，75微克了。。。

============================================

呵呵
图做成这样不能单单归结于是多抗的原因
我倒是更喜欢用多抗
单抗与多抗的区别大家都被一群SB代理商忽悠了
希望战友们多看看抗体的原理，而不是听大家忽悠
你给出的图中的抗体，调整稀释度后，条带肯定会很漂亮
abc816 (2013-10-07 17:02:18)

见了没，就是这种傻样，普通显影没有条带，加强以后，杂带都出来了，可就是目标条带没出来。。。所以我老板让我尽量订单克隆的抗体。。。这个上样量已经够高的了，75微克了。。。

===================================================

这只能说明该多抗也许不行，不不能说明所有的多抗都不行。
不要对多抗有偏见，对于WB来说，多抗比单抗效果往往可能更好。
nvdabing (2013-10-07 17:36:08)

QUOTE:
原帖由 abc816 于 2013-10-7 17:02 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
见了没，就是这种傻样，普通显影没有条带，加强以后，杂带都出来了，可就是目标条带没出来。。。所以我老板让我尽量订单克隆的抗体。。。这个上样量已经够高的了，75微克了。。。

============================================ ...
呵呵，各有利弊，我也正想补充，怕误导别人，放该图片，只是想说明其非特异性条带。。。
abc816 (2013-10-07 17:36:44)

QUOTE:
原帖由 nvdabing 于 2013-10-7 17:36 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

呵呵，各有利弊，我也正想补充，怕误导别人，放该图片，只是想说明其非特异性条带。。。

呵呵，OK。
其实对于WB来说，只要关注目的条带即可，非特异条带通常可以忽略（只要你确认它是非特异条带）。
非特异识别主要影响体现在IF/IHC上。
nvdabing (2013-10-07 17:37:50)

呵呵
图做成这样不能单单归结于是多抗的原因
我倒是更喜欢用多抗
单抗与多抗的区别大家都被一群SB代理商忽悠了
希望战友们多看看抗体的原理，而不是听大家忽悠
你给出的图中的抗体，调整稀释度后，条带肯定会很漂亮

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多谢老师指点，这幅图是加强以后的，所以信号比较强，条带不好看，普通显影都没条带的。。。
nvdabing (2013-10-07 17:38:07)

呵呵，OK。
其实对于WB来说，只要关注目的条带即可，非特异条带通常可以忽略（只要你确认它是非特异条带）。
非特异识别主要影响体现在IF/IHC上。

================

请问
IF/IHC是什么东东呀？
xyw5 (2013-10-07 17:38:33)

QUOTE:
原帖由 nvdabing 于 2013-10-7 17:38 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
呵呵，OK。
其实对于WB来说，只要关注目的条带即可，非特异条带通常可以忽略（只要你确认它是非特异条带）。
非特异识别主要影响体现在IF/IHC上。

================

请问
IF/IHC是什么东东呀？
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