【求助】超滤问题

最新回复

• DCS (2015-9-05 15:41:12)

  请问可以用超滤来去除病毒，节流目的蛋白，细菌病毒流掉了，除菌效果为什么还不如0.2μm的除菌过滤呢？

• iii_ii (2015-9-05 15:41:28)

  整个超滤过程采用密闭管道，完全可以做到无菌的。至于你说的大分子无法通过模芯，建议选用合适空间的膜包或中空纤维。

• milkdog (2015-9-05 15:41:47)

  
  超滤孔径不是大小均一的，切向流技术已经成熟应用到大规模产业化中，所以你需要你的问题在哪？

• vcve (2015-9-05 15:42:53)

  超滤技术很方便，但也有缺陷：它能节流大分子物质，但对细菌节流效果不佳，可以说还不如0.22um的除菌滤芯。请问原因？另外，超滤有浓缩功能，大分子被浓缩无法通过膜芯，机械摩擦会产热，如何保证膜孔径均一？被浓缩蛋白质不变性？
  niufang wrote:
  请问可以用超滤来去除病毒，节流目的蛋白，细菌病毒流掉了，除菌效果为什么还不如0.2μm的除菌过滤呢？
  
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  以上两个问题我理解没错的话，都涉及到是否能用超滤除菌，回复如下：
  1. 除菌过滤膜的定义与孔径无关，仅仅与是否进行过细菌挑战有关。除菌过滤不仅仅是实际检测的无菌，对于制药生产来说更重要的是法规上的意义。
  2. 超滤本身只能开放操作，难以保证过程无菌。
  因此，采用超滤无法进行除菌过滤。至于超滤可以用来除病毒，这是可以的，但除病毒与除菌是不一样的。虽然病毒比细菌小，但除病毒膜从法规意义上是不能除菌的（没有进行细菌挑战）。
  另一个问题是如何保证超滤时蛋白不变性。首先，剪切力或少量的温度上升并不一定会导致蛋白变性，对绝大部分蛋白采用超滤的工艺是不会导致蛋白变性的。其次，我们可以通过改变超滤膜型号、泵种类、切向流速等方式控制剪切力，对于需要低温的蛋白可以通过加装保温夹套的方式维持低温。

• whitesheep (2015-9-05 15:56:40)

  
  哎！我也愁死了！最近在做大分子蛋白的超滤，分子量差不多60KD，用10KD的膜包居然全透了！用5KD的没有透过，但是回流的蛋白浓度据让比原来的低了！我知道应该是被截在膜包里面了！但是为什么呢？求高人解释一下……

• bs4665 (2015-9-05 15:56:59)

  你有10KD的膜无法截留你的目标蛋白，其原因可能有：（1）你的目标蛋白是线性的，线性的蛋白比较容易穿透。一般超滤膜的截留分子量选择为目标蛋白分子量的1/3到1/6，但是各个蛋白的构型和各个厂家生产的超滤膜质量的差异，导致实际应用中的截留率会有一些变化，这个需要自己在膜包选型的时候，做一些实验来验证了。（2）膜包发生破损。你可以测定你膜包的完整性，或者测一下水通量检查一下。
  你采用5KD膜包，蛋白有损失，其原因可能有；（1）你的工艺参数不够合适，导致超滤目标蛋白发生降解，或者变性沉淀。你需要调整缓冲液或者降低剪切力，以增强目标蛋白的稳定性。（2）你的膜包材质不合适。膜包有很多不同材质，有些材质的膜包对蛋白有非特性吸附，这个会导致目标蛋白的损失，通常这个损失量不会很大，如果你的目标蛋白损失很多的话，那么很可能是第一个原因。

• bs4665 (2015-9-05 15:57:21)

  QUOTE:

  原帖由 PPT 于 2015-9-5 15:39 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  超滤技术很方便，但也有缺陷：它能节流大分子物质，但对细菌节流效果不佳，可以说还不如0.22um的除菌滤芯。请问原因？另外，超滤有浓缩功能，大分子被浓缩无法通过膜芯，机械摩擦会产热，如何保证膜孔径均一？被浓缩蛋白质不变性？ ...

  超滤膜除菌效果不如0.22um的除菌滤芯是理所当然的。超滤膜的孔径是不均一的，一般以截留分子量来表征其孔径，而且其定义截留分子量的时候也只是要求达到90%的截留。所以超滤膜对目标分子始终是有渗漏的，不能达到100%截留。这孔径不均一是与超滤膜的结构有关的，超滤膜是一个有一定厚度的不对称结构膜，膜两侧的孔径大小是不一样的。
  除菌滤芯的膜是单层膜，膜孔径十分均一，而且其法规上定义的除菌滤芯都是要达到99.99%的截留才能算是合格的。都需要通过细菌挑战性实验的验证才算合格。所以除菌滤芯的的除菌效果肯定要高于超滤膜。
  所以除菌效果不能只看孔径大小，还得看膜的结构和孔径的定义。

• qhyu (2015-9-05 16:02:19)

  前处理处理的不好吧？

• mimili_901 (2015-9-05 16:03:07)

  
  0.22um的除菌滤芯除菌过滤一般是目标蛋白穿透，细菌被截留。而超滤，孔径更小，导致目标蛋白与细菌都被截留，水和盐分穿透。怎么会提到用超滤除菌呢？

• 49888 (2015-9-05 16:03:39)

  0.22um的除菌滤芯除菌过滤一般是目标蛋白穿透，细菌被截留。而超滤，孔径更小，导致目标蛋白与细菌都被截留，水和盐分穿透。怎么会提到用超滤除菌呢？
  
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  算是有人看到问题所在的了，前面的真可笑

• am10 (2015-9-05 16:04:13)

  
  一般很少用超滤除菌，即使要用的话，需要做验证的，包括超滤管的相容性，都需要做，现在国内没有一家可以做的，我们有一个产品需要做相容和蛋白的截留能力的验证，时间很紧，来不及委托国外做，正在自己摸索方法呢。

• shkudo (2015-9-05 16:04:41)

  
  个人理解是，0.22过滤不是靠孔径大小截留微生物的。

• vcve (2015-9-05 16:06:54)

  QUOTE:

  原帖由 shkudo 于 2015-9-5 16:04 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  个人理解是，0.22过滤不是靠孔径大小截留微生物的。

  大小是一部分，还有多种机理。
  毕竟，大部分微生物大于0.22um
  当然了，目前也发现几种小于0.22um的微生物。