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【求助】包涵体蛋白复性技术的交流
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发表于: 2014-4-21 15:54 作者: xueyouzhang 来源: 分析测试百科网
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【求助】包涵体蛋白复性技术的交流
电泳缓冲液呢,要是用的回收多次的电泳缓冲液, 跑出来的电泳条带分辨率就会降低。
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【求助】包涵体蛋白复性技术的交流
我也来说两句
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最新回复
xueyouzhang
(2014-4-21 15:54:54)
说白了,综述其实就是泛泛而谈,往往是没有真正做过试验的人东一句西一句抄的,参考价值不是很大,但我们在实际试验的过程中会遇到很多小问题,这些小问题不解决试验就不能进行下去,因此可以互相交流,各取所用。
我也没做多少复性试验,但遇到的问题真是不少啊,而且部分问题是综述等说涉及不到的,有问题可以贴出来共同讨论啊。
希望本帖不要沉下去啊!
flower-201
(2014-4-21 15:55:29)
包涵体溶解液常分为两种,一种含高浓度的尿素,另一种为高浓度的盐酸坬由于后者易与SDS结合形成沉淀影响后面的电泳,所以常选用前者。复性我们常用的是梯度透析,透析所用溶液称为复性缓冲液,其所含尿素浓度逐渐降低,依次为6M,4M,3M,2M,1M,0M.最后透析后的蛋白溶液即位复性后的蛋白,可进一步纯化或直接应用。
avi317
(2014-4-21 15:56:55)
蛋白复性,条条框框的理论就那些,我倒是建议可以把自己复性成功的例子拿出来,大家讨论成功的思路及失败的教训,这点比较有用,理论知识还需要实际应用来支撑和验证
小糖块
(2014-4-21 15:57:14)
说白了,综述其实就是泛泛而谈,往往是没有真正做过试验的人东一句西一句抄的,参考价值不是很大,
I really don't think so.
I think you don't read those wonderful articles.
但我们在实际试验的过程中会遇到很多小问题,这些小问题不解决试验就不能进行下去,因此可以互相交流,各取所用。
我也没做多少复性试验,但遇到的问题真是不少啊,而且部分问题是综述等说涉及不到的,有问题可以贴出来共同讨论啊。
希望本帖不要沉下去啊!
......
xueyouzhang
(2014-4-21 15:57:33)
我稀世复性后,再经透析,除去盐和尿素,其上清夜再加低浓度盐后就会沉淀,不知为什么
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【求助】包涵体蛋白复性技术的交流
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xueyouzhang (2014-4-21 15:54:54)
说白了,综述其实就是泛泛而谈,往往是没有真正做过试验的人东一句西一句抄的,参考价值不是很大,但我们在实际试验的过程中会遇到很多小问题,这些小问题不解决试验就不能进行下去,因此可以互相交流,各取所用。
我也没做多少复性试验,但遇到的问题真是不少啊,而且部分问题是综述等说涉及不到的,有问题可以贴出来共同讨论啊。
希望本帖不要沉下去啊!
flower-201 (2014-4-21 15:55:29)
包涵体溶解液常分为两种,一种含高浓度的尿素,另一种为高浓度的盐酸坬由于后者易与SDS结合形成沉淀影响后面的电泳,所以常选用前者。复性我们常用的是梯度透析,透析所用溶液称为复性缓冲液,其所含尿素浓度逐渐降低,依次为6M,4M,3M,2M,1M,0M.最后透析后的蛋白溶液即位复性后的蛋白,可进一步纯化或直接应用。
avi317 (2014-4-21 15:56:55)
蛋白复性,条条框框的理论就那些,我倒是建议可以把自己复性成功的例子拿出来,大家讨论成功的思路及失败的教训,这点比较有用,理论知识还需要实际应用来支撑和验证
小糖块 (2014-4-21 15:57:14)
I really don't think so.
I think you don't read those wonderful articles.
但我们在实际试验的过程中会遇到很多小问题,这些小问题不解决试验就不能进行下去,因此可以互相交流,各取所用。
我也没做多少复性试验,但遇到的问题真是不少啊,而且部分问题是综述等说涉及不到的,有问题可以贴出来共同讨论啊。
希望本帖不要沉下去啊!
......
xueyouzhang (2014-4-21 15:57:33)
【求助】包涵体蛋白复性技术的交流