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【讨论帖】种好你的96孔板
做实验将近一年，从论坛上学到了很多东西，感谢很多战友给予的帮助，现将我在实验过程中的一点儿小小的经验拿出来和大家分享，希望对种96孔板子的战友有帮助。【讨论帖】种好你的96孔板
刚开始用96孔板种细胞时细胞总是分布不均匀，第二天就会发现有些地方出现堆积性生长，而还有不少地方细胞则很稀疏，细胞密集的地方因细胞与细胞之间的接触抑制影响细胞的生长，这样就很难评价干预因素对细胞的作用，因此将96孔板种均匀也是进行后续实验的前提，现将我以前用的老办法和最后用的新方法比较一下，以让大家看看各自优缺。
1、老方法：这个是从论坛学的，就是种过板子后，用手将96孔板平拿起，左右晃动几下，然后再前后晃动几下，不过这种方法5个复孔中总有2-3个孔中细胞分布不均匀，多数情况下是孔的中间出现成堆分布，为此苦恼了一阵子。还又一次见一师姐将种好的板子放在摇床上摇了几分钟，结果更惨了，细胞全部跑到中间了。
2、新方法：这种方法简直是太好了，种的很均匀。先用抢将吹打均匀的细胞吸起来，让后将枪头紧贴着孔的一侧壁（注意枪头的尖不要接触孔底），然后将枪头中的细胞缓缓的打下去，种好之后千万不要摇晃板子，直接放到显微镜下看就可以了，此方法可以说是100%的有效吧。
希望对大家有帮助。
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【讨论帖】种好你的96孔板
最新回复
purrr (2015-6-09 17:46:42)
嗯
后来我也慢慢摸索了，用这种方法种的细胞很均匀
JK.jon (2015-6-09 17:47:13)
我有一个问题想请教LZ啊，你说的这种方法种96孔板很好的话，那24孔板和6孔板之类的大一些的呢？怎么样做才能做到较均一呢！这种方法适合吗？O(∩_∩)O谢谢
@花开花落@ (2015-6-09 17:47:31)
QUOTE:
新方法要不要再孔里先加些培养基？JK.jon (2015-6-09 17:48:28)
还有一个问题就是LZ说的这种新方法用排枪做还行啊？还是需要一个一个孔的加啊！谢谢
tudou85 (2015-6-09 17:48:45)
有个问题楼上也有人问了，这种方法培养基是怎么处理？先放还是最后放？加的时候又有什么要求吗？
多谢指点~
remenb (2015-6-09 17:49:13)
同学习，不知道对于种6孔板是否同样适用。找机会实验一下。
queen (2015-6-09 17:49:33)
purrr (2015-6-09 17:49:49)
之前的经验是一定要先把需要的浓度调整好细胞，然后再种入板中。如果是96孔在中途要再次混匀，不然细胞又会沉淀一点的。至于楼主建议的沿一侧壁加还没有试过，过几天试试。
mickeylin (2015-6-09 17:50:03)
abc816 (2015-6-09 17:50:21)
我比较过，其实用排枪和单独加，排枪效果好一点，把细胞悬液放在培养皿里，每次吸引时都要好好吹打一番。
bs4665 (2015-6-09 17:50:39)
种六孔板要在内测边缘缓慢加入，加完后20分钟内尽量避免移动，如果细胞不均匀的话可水平震动培养液是细胞重新分散，再静置20分钟，后移入培养箱。
米西11米西 (2015-6-09 17:51:06)
谢谢了！刚好准备在96孔板上种细胞，可以试一下。
yizhi (2015-6-09 17:51:20)
谢谢分享，也要注意加入每孔前都要吹打均匀
芙蓉宫主 (2015-6-09 17:51:37)
请问 在室温静止20min 会不会影响细胞生长啊？
gogo (2015-6-09 17:51:53)
BUK (2015-6-09 17:52:07)
jude (2015-6-09 17:52:23)
greenbee (2015-6-09 17:52:37)
谢谢分享，如果要用单个的培养皿养细胞，这种方法也适应吗？以前用培养皿养细胞，接种后分布总是不均匀。
#甜# (2015-6-09 17:53:13)
用力摇几下就匀了，够用力就行
mimili_901 (2015-6-09 17:53:31)
24孔板和6孔板我也种过，不过对细胞均匀要求不是太高，也就没怎么要求，发现种的时候细胞总是中间堆积，可能是孔比较大，孔内的液体很容易晃动，即使种的时候均匀了，取放板子的时候也难免会晃动板子，大家如果有这方面经验的话拿出来分享一下啊！
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