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NIST肽段分析新参考标准问世

2007.5.30

美国国家标准技术院(NIST)出版了参考材料设计方案,改善其测量生物分子样本中肽质量和浓度的实验的性能和可靠性。新的参考材料被认为是蛋白分析中的一种重要工具。

蛋白质组学研究以及蛋白在生物学中的作用是现代医学研究最为引人注目的领域之一。蛋白是经典的大分子,由成百上千个氨基酸组成,也能被分成大约50个或更少个氨基酸组成的链——肽段。分析蛋白通常是利用酶在特定位点切除蛋白,将蛋白分为结构性肽段,利用高效液相色谱(HPLC)等化学分离技术将各种肽段分离,然后利用质谱确定每种肽段的质量。

这种过程的一大不可靠因素是肽的体积、电荷和物理性质不同(如利用HPLC分离的速度)。化学家习惯于利用研究的相对透彻的参考样本作为校准分析仪器的化学尺度,但迄今为止,仍未有相关的肽参考样本。

Association of Biomolecular Resource Facilities (ABRF)很早便意识到对这种肽参考材料的需求。ABRF是一家由产业公司、大学和政府机构的代表建立的非盈利性标准组织,通过与NIST合作,ABRF建立了肽段标准计划委员会,设计和定性三种合成肽为NIST肽参考材料的基础。NIST RM 8327,“分子质量和纯化测量的肽参考材料(Peptide Reference Material for Molecular Mass and Purity Measurements)”由来自分别为11,14和26个氨基酸长的三种肽组成,其净电荷分别为-3,-1和+3。这三种合成肽具有长期稳定性(不含甲硫氨酸、半胱氨酸和色氨酸),一系列纯化、一系列分子质量、蛋白酶切割位点,还含有能够利用UV质谱分析浓度的酪氨酸。

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