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水生所关于斑马鱼基因捕获与插入突变的研究取得突破

2012.9.04

  脊椎动物后基因组时代的主要任务是解读基因的功能,而基因捕获和插入突变是揭示基因功能的重要手段。斑马鱼具有易于饲养、繁育周期短、产卵量大、体外受精与发育等优点,已成为发育和遗传学研究的理想模式动物,但尚缺乏胚胎干细胞和基于胚胎干细胞的基因敲除技术。转座子介导的基因捕获和突变研究为大规模筛选斑马鱼突变体和阐明相关基因的功能提供了新途径。

  中国科学院水生生物研究所崔宗斌研究员学科组在深入研究“睡美人”(Sleeping Beauty)转座子活性机制的基础上,结合现有基因捕获研究的最新成果,设计和构建出转座子介导的基因和poly(A) 捕获载体,并在斑马鱼胚胎发育过程中进行功能基因的捕获研究,取得以下研究成果:1)系统检测了基因和poly(A)捕获载体中相关功能元件的活性;2)利用基因和poly(A)捕获载体,在HeLa细胞中捕获了大量基因,并有效干扰了这些基因的转录表达;3)利用罗非鱼热激蛋白70启动子驱动转座酶的表达,可实现捕获载体在基因组中的再迁移,提高基因捕获效率;4) Cre/LoxP系统可将转座酶基因切除,以稳定突变体;5)利用基因和Poly(A)捕获载体,成功地捕获了斑马鱼基因,显著干扰内源基因的转录表达,并获得了一批突变体。

  这些研究结果为探索斑马鱼基因功能提供了新技术平台,亦为建立斑马鱼突变体库奠定了坚实基础。

  上述研究得到科技部重点基础研究计划和国家自然科学基金的资助,主要由博士研究生宋桂丽等人完成,研究结果已在PLoS ONEJournal of Genetics & Genomics上发表。

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