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【求助】原代肝细胞培养细胞不贴壁?
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发表于: 2014-11-04 14:50 作者: shanzhapia696 来源: 分析测试百科网
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【求助】原代肝细胞培养细胞不贴壁?
做小鼠原代肝细胞培养的时候出现了细胞不贴壁(玻璃瓶)的情况,怎么也找不出原因,而且用胰酶消化后细胞量少,不知道哪位高手可以给我解答一下,万分感谢.
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【求助】原代肝细胞培养细胞不贴壁?
我也来说两句
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最新回复
cocacola
(2014-11-04 14:50:36)
血清的质量,培养液的PH值,消化时间以及培养瓶等都会影响细胞的贴壁,你可以换塑料培养瓶或培养板试一下!
idea2011
(2014-11-04 14:50:54)
不贴壁主要原因第一是细胞活力差,第二是缺少促贴壁物质。消化分离结束后的细胞活力如何?不行换胶原酶。
fangxiang
(2014-11-04 14:51:08)
一般动物成体器官的细胞培养都比较困难,贴壁和增殖都很成问题,你可以用乳鼠的试试,一般贴壁性和活性要高。我没有做过肝细胞培养,我做胰岛细胞培养,发现成体的胰岛细胞根本不贴壁。 如果有条件最好买成熟的细胞系,培养方便,做原代很累人,而且好多时候还要看机会。 玻璃瓶最好用鼠尾胶原处理,可以增加贴壁性。
fangxiang
(2014-11-04 14:51:26)
补充两点非常重要。 1 原代培养胎牛血清含量一定要高,一般20%~30% 2 胰酶消化时间一定要控制好,胰酶消化时间长对细胞活性影响非常大。
ritou1985
(2014-11-04 14:51:51)
我刚发了一个有关肝细胞培养的帖子,在里面转了一圈,就见到了你的帖子.
我的意见是:
(1):肝细胞培养恐怕必需用胶原酶.
(2):拨玻璃瓶一定要包被(poly lysin or 自制鼠尾胶原)
hyuu
(2014-11-04 14:52:12)
买胶原包被的培养板(200元左右) 用胶原或明胶自己包被省钱
IAM007
(2014-11-04 14:52:31)
换一次的培养板就省事了,可给您的工作节省很多时间! 价格优惠何乐不为呢?节省时间您可以去做其他事情呀!这样您的工作不是轻松了高效率了吗!
misswu61
(2014-11-04 14:52:50)
用胶原酶 鼠尾胶原包被 换塑料培养瓶 加生长因子
leifengta
(2014-11-04 14:53:07)
有的资料上说胶原酶消化最好不要超过10分钟
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【求助】原代肝细胞培养细胞不贴壁?
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cocacola (2014-11-04 14:50:36)
血清的质量,培养液的PH值,消化时间以及培养瓶等都会影响细胞的贴壁,你可以换塑料培养瓶或培养板试一下!
idea2011 (2014-11-04 14:50:54)
fangxiang (2014-11-04 14:51:08)
一般动物成体器官的细胞培养都比较困难,贴壁和增殖都很成问题,你可以用乳鼠的试试,一般贴壁性和活性要高。我没有做过肝细胞培养,我做胰岛细胞培养,发现成体的胰岛细胞根本不贴壁。 如果有条件最好买成熟的细胞系,培养方便,做原代很累人,而且好多时候还要看机会。 玻璃瓶最好用鼠尾胶原处理,可以增加贴壁性。
fangxiang (2014-11-04 14:51:26)
ritou1985 (2014-11-04 14:51:51)
我刚发了一个有关肝细胞培养的帖子,在里面转了一圈,就见到了你的帖子.
我的意见是:
(1):肝细胞培养恐怕必需用胶原酶.
(2):拨玻璃瓶一定要包被(poly lysin or 自制鼠尾胶原)
hyuu (2014-11-04 14:52:12)
买胶原包被的培养板(200元左右) 用胶原或明胶自己包被省钱
IAM007 (2014-11-04 14:52:31)
换一次的培养板就省事了,可给您的工作节省很多时间! 价格优惠何乐不为呢?节省时间您可以去做其他事情呀!这样您的工作不是轻松了高效率了吗!
misswu61 (2014-11-04 14:52:50)
leifengta (2014-11-04 14:53:07)
【求助】原代肝细胞培养细胞不贴壁?