【求助】请教 HPLC柱效不高 应如何提高柱效

本人完全新手,以前实验室也从来没做过HPLC
柱子是见年1月买的,用过一次,但是我觉得可能是新柱子没有激活好   现在的柱效不好
所以有没有哪位能指点下  应如何处理
柱子是国产的  C18反相柱
无比感谢!

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最新回复

  • avi317 (2015-7-18 17:02:26)


    难提高柱效 这个是柱子本身的质量性能参数
    建议买根好点的柱子
  • wiwi (2015-7-18 17:02:43)

    柱子本身问题,最好的办法就是再换一个好的
  • duchy (2015-7-18 17:04:22)

    没办法提高柱效的,就算是生产柱子的公司,在发现柱效低的情况下也只有报废,重做!
    你跟对方公司交涉一下,才用过一次,如果不是操作不当就只能是柱子不好,找他们换!
  • boom (2015-7-18 17:04:38)

    柱效是柱子本身固有的特性,受柱长和颗粒度的影响。
    柱效损失可能的原因:1.洗脱的平衡时间不够,
                       2.不正确的柱温,
                       3.不正确的修正浓度,
                       4.床压缩   使用了过大的洗脱流速。
                检查一下你在使用过程中是否存在上述问题?
  • 麻瓜 (2015-7-18 17:04:56)

    楼上的朋友都说了,我认为,还是先确认下问题所在,在做出决定。
    换柱子还是找厂家……
  • ztonyc (2015-7-18 17:05:13)

    这柱子是否适合你试验的色谱条件...
  • wawa (2015-7-18 17:05:40)

    做梦呢吧   柱效不好的只能报废了
  • xuuuu (2015-7-18 17:06:04)

    QUOTE:

    原帖由 wawa 于 2015-7-18 17:05 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
    做梦呢吧   柱效不好的只能报废了
    大家都是来学习的,有句话说的好“会了不难,难了不会”也许你是液相方面的高手,望你以后多来论坛与大家进行技术方面的探讨。不过论坛里也有很多新手,问的问题也许对于经验丰富的高手来说比较简单,但高手也是从新手一步一步成长起来的,所以希望大家给新手理解与帮助,回答问题时注意一下说话的语气。大家共同进步才是真的进步!
    对于楼主的问题,今天发现了点相关资料,如下:
    因柱效是柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同的柱效,对于一根特定的色谱柱,要追求最佳柱效,最好使用最佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱,流速一般选择1ml/min。对于内径为4.0mm柱,流速为0.8ml/min为佳。
  • 1221 (2015-7-18 17:06:29)

    柱效?拿在手里开始用的时候就是要考虑延长寿命问题,而不是提高柱效问题。
  • wawa (2015-7-18 17:07:13)

    我觉得还有个补充,我发现进样量不同,柱效也有变化,进样量小,柱效会高一些,进样量大,柱效会低一点。不过影响不是很大,柱效波动也就1000多。本人新手,还望大家多多指教!!!
  • cj_mondy (2015-7-18 17:07:32)


    是的
    进样量小了,分的彻底;进样了大了,柱子的分离负担大,要是过载了,就出现平头缝了
  • wu11998866 (2015-7-18 17:07:51)

    柱效是没法提高的,随着使用是会降低的
    我们需要想办法如何正确合理的使用柱子,尽量延长使用寿命
    你可以看一下你的流动相、样品、周围的环境、温度等
  • ujne (2015-7-18 17:08:14)

    按照厂家提供的标准条件先做个测试,如果仪器状态正常的话应该差别不大。柱效是出厂控制指标之一,很重要,用来衡量柱子填装的好坏。
  • 仙客来 (2015-7-18 17:08:31)

    首先,仔细检查柱子两端和检测器等各个地方的接头有没有接好,接合不好会造成额外的死体积影响注销,
    然后,用纯的甲醇或乙腈冲洗色谱柱10~20个住体积,4.6×250mm的柱柱体积约是2.5mL,其他规格的可以按比例核算,这样做是为了充分浸润硅胶表面的键合相,保证色谱柱的效果,
    做完上述准备工作后,按照包装内说明书上的注销报告方法测定住注销(包括标样种类和浓度都要一致),测得的柱效如果远远低于报告中的正常柱效范围(通常是以理论塔板数计算),那说明你的柱子确实是注效偏低了,
    如果这样测定的注效没有问题的话,那就要怀疑是你的方法问题了
  • 碎星星 (2015-7-18 17:08:50)


    柱效在柱子出厂的时候已经决定了,你是改不了的
    你所说的提高柱效其实就是要分离好你现在做的样品
    你要是想在分析某物质的时候达到最佳的分离效果,你就得好好的摸索一下分析方法了。
    不知道我理解的对不对
  • 阿福 (2015-7-18 17:10:47)

    用乙腈洗几天可以提高柱效
  • DCS (2015-7-18 17:11:04)


    这个是一个高手说的,色谱柱使用后柱效降低后提高柱效的方法:

    1)用3%乙酸溶液和甲醇二元梯度100%甲醇到10%甲醇,一小时做个来回,柱子耐不了pH10的就用1%乙酸。

    2)先用90%的甲醇-再用纯甲醇-二氯甲烷。每个都要冲够20--30的体积。然后再相反依次冲

    不行的话用40%的异丙醇冲,不过异丙醇用100%的可能压力太大,因为它的粘度太大

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  • wawa (2015-7-18 17:11:20)


    算了吧  还是换根好些   也不是歧视国产  但有的时候它就 是不争气  没有办法