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【求助】请教 HPLC柱效不高 应如何提高柱效
本人完全新手,以前实验室也从来没做过HPLC【求助】请教 HPLC柱效不高 应如何提高柱效
柱子是见年1月买的,用过一次,但是我觉得可能是新柱子没有激活好 现在的柱效不好
所以有没有哪位能指点下 应如何处理
柱子是国产的 C18反相柱
无比感谢!
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【求助】请教 HPLC柱效不高 应如何提高柱效
【求助】请教 HPLC柱效不高 应如何提高柱效
字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2015-7-18 17:02 作者: bbc 来源: 分析测试百科网
最新回复
avi317 (2015-7-18 17:02:26)
难提高柱效 这个是柱子本身的质量性能参数
建议买根好点的柱子
wiwi (2015-7-18 17:02:43)
duchy (2015-7-18 17:04:22)
你跟对方公司交涉一下,才用过一次,如果不是操作不当就只能是柱子不好,找他们换!
boom (2015-7-18 17:04:38)
柱效损失可能的原因:1.洗脱的平衡时间不够,
2.不正确的柱温,
3.不正确的修正浓度,
4.床压缩 使用了过大的洗脱流速。
检查一下你在使用过程中是否存在上述问题?
麻瓜 (2015-7-18 17:04:56)
换柱子还是找厂家……
ztonyc (2015-7-18 17:05:13)
wawa (2015-7-18 17:05:40)
xuuuu (2015-7-18 17:06:04)
QUOTE:
大家都是来学习的,有句话说的好“会了不难,难了不会”也许你是液相方面的高手,望你以后多来论坛与大家进行技术方面的探讨。不过论坛里也有很多新手,问的问题也许对于经验丰富的高手来说比较简单,但高手也是从新手一步一步成长起来的,所以希望大家给新手理解与帮助,回答问题时注意一下说话的语气。大家共同进步才是真的进步!对于楼主的问题,今天发现了点相关资料,如下:
因柱效是柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同的柱效,对于一根特定的色谱柱,要追求最佳柱效,最好使用最佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱,流速一般选择1ml/min。对于内径为4.0mm柱,流速为0.8ml/min为佳。
1221 (2015-7-18 17:06:29)
wawa (2015-7-18 17:07:13)
cj_mondy (2015-7-18 17:07:32)
是的
进样量小了,分的彻底;进样了大了,柱子的分离负担大,要是过载了,就出现平头缝了
wu11998866 (2015-7-18 17:07:51)
我们需要想办法如何正确合理的使用柱子,尽量延长使用寿命
你可以看一下你的流动相、样品、周围的环境、温度等
ujne (2015-7-18 17:08:14)
仙客来 (2015-7-18 17:08:31)
然后,用纯的甲醇或乙腈冲洗色谱柱10~20个住体积,4.6×250mm的柱柱体积约是2.5mL,其他规格的可以按比例核算,这样做是为了充分浸润硅胶表面的键合相,保证色谱柱的效果,
做完上述准备工作后,按照包装内说明书上的注销报告方法测定住注销(包括标样种类和浓度都要一致),测得的柱效如果远远低于报告中的正常柱效范围(通常是以理论塔板数计算),那说明你的柱子确实是注效偏低了,
如果这样测定的注效没有问题的话,那就要怀疑是你的方法问题了
碎星星 (2015-7-18 17:08:50)
柱效在柱子出厂的时候已经决定了,你是改不了的
你所说的提高柱效其实就是要分离好你现在做的样品
你要是想在分析某物质的时候达到最佳的分离效果,你就得好好的摸索一下分析方法了。
不知道我理解的对不对
阿福 (2015-7-18 17:10:47)
DCS (2015-7-18 17:11:04)
这个是一个高手说的,色谱柱使用后柱效降低后提高柱效的方法:
1)用3%乙酸溶液和甲醇二元梯度100%甲醇到10%甲醇,一小时做个来回,柱子耐不了pH10的就用1%乙酸。
2)先用90%的甲醇-再用纯甲醇-二氯甲烷。每个都要冲够20--30的体积。然后再相反依次冲
不行的话用40%的异丙醇冲,不过异丙醇用100%的可能压力太大,因为它的粘度太大
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wawa (2015-7-18 17:11:20)
算了吧 还是换根好些 也不是歧视国产 但有的时候它就 是不争气 没有办法
【求助】请教 HPLC柱效不高 应如何提高柱效