【求助】DNA ladder 观察细胞凋亡

最新回复

• bhka (2016-3-11 16:18:29)

  我做的也是这个样子，不知道怎么回事。也是碧云天的试剂盒。

• bhka (2016-3-11 16:21:26)

  后来不用这个方法了呗，检测细胞凋亡的手段很多。我用了Annexin V-FITC/PI双染、caspase-3活性检测（包括cleaved caspase-3表达量的检测或底物显色法）

• shenkunjie (2016-3-11 16:21:41)

  6楼正解～楼主可尝试其他检测凋亡的实验技术～例如流式，WB，tunel～DNA ladder，彗星电泳检测现在很少用了～除非楼主有特殊的实验目的和要求～～

• bongte (2016-3-11 16:23:32)

  DNA ladder出现的时间很短，要么更换研究技术，要么用较为密集的时间点，工作量比较大。

• 嗅嗅 (2016-3-11 16:23:50)

  QUOTE:

  原帖由 bongte 于 2016-3-11 16:23 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  DNA ladder出现的时间很短，要么更换研究技术，要么用较为密集的时间点，工作量比较大。

  可是不加药的细胞也出现DNA碎片，那就应该不是时间问题吧？

• bongte (2016-3-11 16:24:14)

  QUOTE:

  原帖由 嗅嗅 于 2016-3-11 16:23 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  可是不加药的细胞也出现DNA碎片，那就应该不是时间问题吧？

  那就是细胞的问题，只能说这个技术不适合您的细胞，更换技术吧。

• zhezhe (2016-3-11 16:24:34)

  不是正常现象吗？？
  前面的，不是RNA吗？？
  中间有些亮，是不是样品太浓了或者提取的时候操作太粗鲁DNA有些破碎？
  

• DNA (2016-3-11 16:24:54)

  你好，请问你的DNA ladder实验做出来了吗，我最近也在做这个实验

• 嗅嗅 (2016-3-11 16:25:12)

  QUOTE:

  原帖由 DNA 于 2016-3-11 16:24 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  你好，请问你的DNA ladder实验做出来了吗，我最近也在做这个实验

  没做出来

• kswl870 (2016-3-11 16:25:28)

  从该图片中看不出有任何ladder出现。前面的更像是RNA。原因可能是你所用的药物在你所用的实验条件下没有引起细胞凋亡。建议：加一个positive control，就是明确知道出现细胞凋亡的组（任何手段都可以）
  

• +小生怕怕+ (2016-3-11 16:28:10)

  后来不用这个方法了呗，检测细胞凋亡的手段很多。我用了Annexin V-FITC/PI双染、caspase-3活性检测（包括cleaved caspase-3表达量的检测或底物显色法）...
  
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  我也想检测caspase3的活性，买的碧云天的caspase3活性检测试剂盒，但是一直没有结果，caspase3一直没有表达，我想请教一下你是用什么来检测caspase3的活性的？

• woshituzhu (2016-3-11 16:28:47)

  QUOTE:

  原帖由 +小生怕怕+ 于 2016-3-11 16:28 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  后来不用这个方法了呗，检测细胞凋亡的手段很多。我用了Annexin V-FITC/PI双染、caspase-3活性检测（包括cleaved caspase-3表达量的检测或底物显色法）...
  
  ============================================================ ...

  碧云天的caspase3活性检测试剂盒我也用过，这个盒子对不同的细胞种类细胞数要求是不一样的，你要做细胞数梯度。我还用了westernblot检测cleaved caspase-3表达量。

• hustwb (2016-3-11 16:30:01)

  我做的DNA ladder差不多也是这样，阴性和加药组没什么区别，见下图：1为marker，2是阴性不加药组，3和4是两种不同的药，请问这是ladder吗？怎样避免阴性组的DNA断裂？

  
  bw178h4027719_1439880548_539.jpg

• vtongli (2016-3-11 16:31:40)

  我的挺好看呐，但是为什么阴性对照有ladder 呀。。。。