【求助】扫描电镜做植物样本

最新回复

• 今生如此 (2016-4-30 14:52:53)

  电压降低一点应该会好一些吧，植物样品一般都很容易受到辐照损伤的。

• 钻石 (2016-4-30 14:53:16)

  能说得具体一点吧，比如说，用的是什么设备，工作条件是什么样的，辐照损伤到什么程度，观察的倍数之类的。
  我用25KV做花瓣也没什损伤，所以很奇怪，不过电压稍微低一点表面会体现得更好一些。
  给你两个照片，权作参考。

• 8899 (2016-4-30 14:53:37)

  样品是怎么处理的呢，用的是钨灯丝的电镜吧，好象真空度比较低。

• huali (2016-4-30 14:53:58)

  曾经做过一次，按照下面的步骤做的，但是效果不好，细菌拍下来不立体。
  将菌液以3000r /min转速离心10min后，弃上清液。注入 2.5%戊二醛，静置2h以上固定。固定后离心，将细菌沉积，弃上清，以蒸馏水重悬浮，重复3次，最后以蒸馏水重悬。分别用30%、50 %、70 %、80%、90%梯度浓度酒精脱水，每个梯度中静置 10min，脱水完毕，用纯酒精脱水 3次，每次30min，然后用纯叔丁醇置换酒精3次, 每次30min，最后吸取混匀的细菌-叔丁醇悬浮液滴在覆有盖玻片的样品台上，置冷冻干燥机内真空干燥。

• 燕子@ (2016-4-30 14:54:22)

  有一些不明白的地方是：酒精梯度干燥的时候，静置10分钟后，是不是需要离心，然后弃上清，再加下一个梯度的酒精干燥？这个地方一直想不通，如果不离心的话，酒精中的水分不是一直都无法散去吗？

• 8899 (2016-4-30 14:54:42)

  补充一下：PBS也是保护细胞形态的，原理你应该懂得。

• 兔子 (2016-4-30 14:55:05)

  我的细菌样品如果处理好，4天后才能拍电镜的照片，会不会影响结果？如果不影响，我是放在-80℃里保存4天呢，还是放在-20℃呢？谢谢啦

• 跳跳哈里 (2016-4-30 14:55:32)

  处理好了就是冷冻干燥了，这才叫处理好。如果还没条件冷冻干燥那就可以现在-80放着，要冷冻干燥了再拿去干燥。如果你是冷冻干燥后，要保存，只能放在有干燥剂的地方，如果你这个也不知道就没法指导了。好像你很多都不知道啊？说得也不清不楚，我往往要两头解释。

• 哈密瓜 (2016-4-30 14:55:55)

  冷冻干燥的目的一是出去结合水，使电镜时不会被干扰。还有就是为了形态稳定，毕竟在处理过程中有了固定化的步骤。你还是好好理解下各个步骤的原理吧