【求助】关于设计定量PCR引物的问题

字体: 小中大 | 打印发表于: 2015-2-23 23:21 作者: S6044 来源: 分析测试百科网

请问有谁会设计定量pcr的引物呀？还望给些指导呀~

nikun230 (2015-2-23 23:22:00)

普通PCR引物设计的原则，尽量遵从。关键是你的产物大小，大小尽量不要超过200bp，最好不要超过150bp。120bp，130bp这样的长度是最最好的。你多设计几对引物，设计个2～3对，回来之后试一下。
莲花白 (2015-2-23 23:22:19)

设计引物有专门的软件，学习那个就可以了，但要注意引物设计的一些原则，fermentas产品目录书中有相关内容，可以参考看看！
uaubc (2015-2-23 23:22:38)

还得看你做的是SYBR Green I还是Taqman探针方法。
S6044 (2015-2-23 23:23:03)

QUOTE:
原帖由 uaubc 于 2015-2-23 23:22 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

还得看你做的是SYBR Green I还是Taqman探针方法。
我用的是SYBR Green的方法
bangqi_k (2015-2-23 23:23:22)

直接百度吧，不懂得再来问，问题要具体大家才好帮你解决
ha111 (2015-2-23 23:23:40)

其实和平时设计引物差不多啦，扩增产物要一般小于300bp，目的基因的退火温度需与你内参基因退火温度一致。
mod=8048 (2015-2-23 23:23:58)

有软件，它可以帮你设计，你只需要看看软件设计出来的符不符合对qRTPCR引物的基本要求就可以了。