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【求助】求高人指导：我的乳腺癌细胞MCF-7怎么了？
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亲爱的朋友们，
能不能帮我看看细胞怎么了。乳腺癌细胞MCF-7，养着养着就成这样子了，背景特别脏，还有类似死细胞出现。求解释或者解决方法。欲哭无泪啊~~~~~小女子不胜感激。
情况如图。我的细胞：
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乳腺癌细胞MCF-7.jpg
字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2015-2-24 15:37 作者: 黄花菜 来源: 分析测试百科网
乳腺癌细胞MCF-7.jpg
最新回复
黄花菜 (2015-2-24 15:37:58)
MCF7.jpg
11_hjx (2015-2-24 15:38:19)
damingxia0904 (2015-2-24 15:38:36)
污染了。操作的时候注意一下，如果发现养的过程中有黑点出现，就用PBS 洗一下，换液。还有不知道你们养这个细胞用什么培养基,这个细胞应该很好养，我养的一直
am10 (2015-2-24 15:38:56)
污染了，重新复苏一遍看看情况
黄花菜 (2015-2-24 15:39:16)
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谢谢先，污染下面的小黑点应该是动的，这个不太像黄花菜 (2015-2-24 15:39:33)
QUOTE:
谢谢先，污染下面的小黑点应该是动的，这个不太像，刚开始养还挺好的，养着养着就变成这样了黄花菜 (2015-2-24 15:39:57)
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谢谢先，我们用的1640+10%FBS+PS，刚开始养还挺好的，养着养着就变成这样了， 污染下面的小黑点应该是动的，这个不太像也，感觉像是细胞老死了，会是传代太多吗chenshuanhe (2015-2-24 15:40:17)
youreyes (2015-2-24 15:40:34)
用DMEM 吧
kewanqi2011 (2015-2-24 15:40:59)
培养基的问题或者是这批细胞养的太久，细胞已经老化，周围很多细胞碎片，建议重新复苏或买新的细胞、换培基，这批细胞要不得了
ilovegaga (2015-2-24 15:41:17)
这个细胞可以丢了，没必要再养了，状态很差，我实验室之前出现过这种情况，可能与血清有关，不过具体原因不详
prettygirl@ (2015-2-24 15:41:54)
我觉得，可以挽救，用pbs清洗几遍，我之前用那种10ml的移液管，一次吸取10ml的pbs,把皿竖直放在废液缸上方，洗了8遍，然后加入新鲜培养基，在观察。
还有，就是传细胞不能传太稀，太稀了状态一定不好。
##蒙奇奇 (2015-2-24 15:42:15)
如果你不确定小黑点是否做无规则运动，你可能在琼脂检测板上看看，小黑点游动的话可能是染菌。
yapuyapu (2015-2-24 15:42:31)
应该不是污染，你应该注意一下你的培养基，不知道是自己配制的还是买的
any333 (2015-2-24 15:42:48)
是不是每次都长得太密了，那些东西的确是细胞碎片，换细胞吧
summerxx (2015-2-24 15:43:09)
summerxx (2015-2-24 15:43:26)
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我们的培养基是DMEM高糖+10%FBS+1%PS+1%NEAA。你可以尝试一下！如果是污染了，你首先看一下细胞培养基，就是从孵箱里拿出来的时候先不用显微镜观察，直接看培养基，培养基浑浊的话就是污染了，你在显微镜下会发现细胞死了，飘起来了，细胞不亮，只要是活细胞都会有折光率的，细胞周围会发一圈的亮，如果仅仅是营养不够了，你的培养基会变黄，但是还是透明的，不是浑浊的！还有那个细胞碎片，有可能是细胞自噬的结果，另外如果你在高倍镜下发现小黑点在动，有可能就是黑胶虫，抓紧用PBS洗几遍，黑胶虫是血清自带的，你百度一下，它会跟细胞发生竞争培养基养分，所以及时换液给细胞提供足够的养分！
HPLC使者 (2015-2-24 15:43:43)
ns5fan (2015-2-24 15:46:18)
貌似是黑胶虫污染，显微镜下会布朗运动，黑胶虫会随着细胞传代而传代，开始生长很缓慢，时间长了就会爆发。如果你的培养液没有变黄，细胞生长速度还可以的话，就可能是黑胶虫污染了。照这样的密度下去不出几天就会沙化，最后对焦对不上
zzzz (2015-2-24 15:46:36)
污染了吧
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