【求助】多聚赖氨酸包被培养板

最新回复

• youyou99 (2015-6-09 18:11:55)

  我曾用过多聚赖氨酸包被培养瓶,但浓度是0.1mg/ml,我都是放一夜,第二天吸掉晾干就用,当然要紫外消一下.我觉得时间长点没什么大碍.但不知道你的细胞是什么,是不是娇气的那种?也不知道我的方法对不对,大家多指点一下吧.谢谢了先!

• 龙小好汉 (2015-6-09 18:12:10)

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  先天性卵巢发育不全综合征
  我养的是海马神经元，算是比较娇气的一种细胞，我们这里的老师说，多聚赖氨酸不能用紫外线照射。请问大家配置的多聚赖氨酸能在4度冰箱里放多久？

• jkobn (2015-6-09 18:12:25)

  
  1,用赖氨酸包被培养板和培养瓶时，应该选用多聚左旋赖氨酸(分子量为15-30万) ；
  2，感觉你“浓度为50ng/1ml”有些低，我一般最后多聚赖氨酸使用浓度达到20－30ug/ml；
  3，包被时间一般为6－7h，或者过夜也可；
  4，使用时应该先用灭菌水洗三次＋PBS（起平衡盐作用）洗一次，洗液的量应该大于包被液的量；
  5，“多聚赖氨酸可以在培养瓶中放多长时间，太长了会有影响吗？”，我包被时间最长的经历 有过48h,最后只是多聚赖氨酸随着时间延长蒸发一些而量变少了，但是对细胞生长并无大碍，这是我曾经有过的经历，所以我会负责地告诉你；
  6，“多聚赖氨酸能在4度冰箱里放多久？”，最好置于－20度保存，放置数月乃至半年都可以；
  祝你们实验顺利

• ldh (2015-6-09 18:12:41)

  
  我直接用博士德分装的SIGMA 10ml包装的Poly-L-Lysine，没写浓度，请问这个浓度是多大的呢？要稀释多少倍???(通常用来做免疫组化封片的）,谢谢。

• rfv (2015-6-09 18:13:04)

  
  我问过博士的公司，他们分装的多聚赖氨酸是用来作免疫组化的，没有做过细胞培养实验，他们不保证能否用在细胞培养中，建议你买其他公司的吧，有固体的，分子量为15-30万，我们实验室用浓度0.01%的来促进神经细胞贴壁

• 龙小好汉 (2015-6-09 18:13:23)

  实在对不起，我的多聚赖氨酸的浓度是50ug/ml，因为笔误把单位搞错了，请各位多包涵啦！谢谢你的回答！

• xue258 (2015-6-09 18:13:41)

  
  我们用的多聚赖氨酸浓度为100ug/ml,一般包被3-4小时即可用.我们包被完后一般放在培养箱里,临用时拿出来洗三次，吹干即可．如果不急着用，放在培养箱里较长时间也没关系，把瓶盖拧紧即可，我最长放了２星期也没有问题．

• xue258 (2015-6-09 18:13:57)

  我们的多聚赖氨酸一般可反复用５－６次．

• quiqui008 (2015-6-09 18:14:16)

  
  左旋和右旋的多聚赖氨酸都可以用于包被细胞培养器具,主要看你的细胞贴壁能力如何,左旋的更利于细胞贴壁.我们一般使用0.01%浓度的,包被过夜,第二天用双蒸水洗两三次,超净台紫外照射,风干.可以直接买sigma的原装粉剂自己配.还有,配好的多聚赖氨酸在4度时间不能放置太久,大概就一两周吧.存放于-20度中的一般为0.1%的,而且不能反复冻融,只能融化一次.最好是配好后分装.

• zbboom (2015-6-09 18:14:32)

  
  可用生理盐水配置吗？？？用PBS？？？

• BUK (2015-6-09 18:14:47)

  
  不用紫外照射，那就是说多聚赖氨酸在配置的时候就要过滤除菌了？请各位大师指点！你们怎么做的？

• mercedes (2015-6-09 18:15:04)

  
  请问大家，我要将细胞核贴在裱称了赖氨酸的玻璃板上，大概需要多少时间才能基本粘附呢？

• finger (2015-6-09 18:15:27)

  可用生理盐水配置吗？？？用PBS？？？
  
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  可以用PBS配吗，请问你最后有没有问到这个问题。。

• finger (2015-6-09 18:15:44)

  1,用赖氨酸包被培养板和培养瓶时，应该选用多聚左旋赖氨酸(分子量为15-30万) ；
  2，感觉你“浓度为50ng/1ml”有些低，我一般最后多聚赖氨酸使用浓度达到20－30ug/ml；
  3，包被时间一般为6－7h，或者过夜也可；
  4，使用时应该先用灭菌水洗三次＋PBS（起平衡盐作用）洗一次，洗液的量应该大于包被液的量；
  5，“多聚赖氨酸可以在培养瓶中放多长时间，太长了会有影响吗？”，我包被时间最长的经历 有过48h,最后只是多聚赖氨酸随着时间延长蒸发一些而量变少了，但是对细胞生长并无大碍，这是我曾经有过的经历，所以我会负责地告诉你；
  6，“多聚赖氨酸能在4度冰箱里放多久？”，最好置于－20度保存，放置数月乃至半年都可以；
  祝你们实验顺利
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  请问：
  1：多聚鸟氨酸有没有重复利用，是否可以直接吸起来包被另外一个培养板，那假如这样子要如何存放呢？上面有人说放在37°孵箱中，但我看到的说明书是放在室温中。。
  2：你们有否在多聚鸟氨酸包被以后继续用laminin包被？
  3：我用的多聚鸟氨酸浓度为10ug/ml，保存的母液为10mg/ml，要以怎样的浓度保存比较好呢？
  太打扰您了

• zbboom (2015-6-09 18:15:58)

  
  PBS可以配置多聚赖氨酸溶液，好像PLL比PDL细胞毒性大一些，最好用PDL包被，现在有卖成品的也不贵，我们买的BIOCHO的多聚赖氨酸培养瓶比自己包被的好使。

• utt0989 (2015-6-09 18:16:25)

  不用紫外照射，那就是说多聚赖氨酸在配置的时候就要过滤除菌了？请各位大师指点！你们怎么做的？
  你好，我也要用到这个方法，你在实际过程中是否过滤除菌了？过滤后会影响细胞贴壁吗？谢谢了

• birdfish (2015-6-09 18:16:44)

  我用的是碧云天的，买来就是1mg/ml的液体，我稀释十倍，滴在盖玻片上，10min即可。用蒸馏水冲洗十遍就可以用了。非常好用。

• DCS (2015-6-09 18:16:58)

  当多聚赖氨酸铺在具有疏水性的胶上面，大概需要铺多久啊？一夜吗？