【求助】转移时间

最新回复

• mimili_901 (2014-4-21 16:24:21)

  一般可以用310mA，90分钟，我一直这么做，挺好的

• yjf1026 (2014-4-21 16:24:43)

  
  请问楼上喜用火木 您用的条件310mA，90分钟蛋白分子量也是20左右的吗？
  是否为湿转？

• hold住 (2014-4-21 16:24:59)

  80毫安,2小时

• nn255 (2014-4-21 16:25:15)

  
  谢谢，我也觉得３１０mＡ　２h，是不太行的，我用９０ＭＡ　２h，不行

• zsxan1990 (2014-4-21 16:25:34)

  
  做WESTERN很长时间，关于转膜时间也看了很多，问过许多牛人，令我诧异的是，大家的条件差异大的惊人，
  我感觉膜的孔径非常重要，要是小孔径的膜，时间长，电流大是没有太大问题的，而大孔径的膜，就有穿膜的危险了，推荐，100MA 170分钟，呵呵，祝实验顺利

• tangxin_80 (2014-4-21 16:25:54)

  
  用0.22um的膜，对于100-20kda的蛋白，4度条件，或将转移槽置于冰中400mA, 1小时即可，没有问题，我一直这样做。

• nn255 (2014-4-21 16:26:15)

  我用的是PVDF膜 湿转 20左右到100左右都能转上呀。

• xyw5 (2014-4-21 16:26:35)

  
  应该和转膜装置有关吧，楼上的湿转都是biorad的小胶电泳槽吗