液液萃取-GFAAS法测定生物样品中的Cu(Ⅰ)
液液萃取-石墨炉原子吸收法测定生物样品中Cu(Ⅰ)方法.200μL血清及细胞匀浆、细胞膜液等样本与200μL 30％ 三氯乙酸混匀后,离心去蛋白,取上清液400与1500μLpH为12.5的甘氨酸-NaOH-缓冲溶液混至pH约为9,加入含1000μL 0.05％2,2′-联喹啉的正戊醇溶液,旋涡振荡1 min,静置分层后取有机层500μL置于2 m L特氟隆消化管,于95℃烘箱烘6 h挥发有机溶剂,冷却至室温后分别加入200μL硝酸和双氧水,80℃水浴消化,室温加入600μL 1％ 硝酸后用石墨炉原子吸收法,测定的结果为Cu(Ⅰ)含量.另取100μL血清(200μL细胞匀浆、细胞膜液)置于2 m L特氟隆消化管,于80℃烘箱烘5 h至样品干燥,冷却至室温分别加入200μL硝酸和双氧水,80℃水浴消化后,室温用1％ 硝酸稀释成1000μL,用石墨炉原子吸收法测定总铜含量.方法检测限:0.04μg·L-1,相对偏差<5％.回收率:95％ ～102％.用此法检测了一些无机样品和生物样品.测定的结果表明,宫颈癌患者血清Cu(Ⅰ)比正常人要高,总铜含量差别不大.一些无机样品如自来水、农夫山泉水、尿液含Cu(Ⅱ)离子不含Cu(Ⅰ)离子,而生物样品如肝细胞及肝细胞膜含有Cu(Ⅰ)离子不含Cu(Ⅱ)离子.本法可以在混有Cu(Ⅱ)离子的情况下测定Cu(Ⅰ)离子,且10倍Cu(Ⅱ)离子浓度存在下测定痕量Cu(Ⅰ)离子无干扰.
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