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冷冻离心机单核细胞分离技术介绍

2020.4.20

专业生产各种低速离心机,大容量离心机,冷冻离心机,产品广泛应用于农业科学、生物工程、食品、化工、制药、临床医学、血站血库、检验检疫、疾控、环保等科研和生产单位。冷冻离心机干细胞分离技术主要分为铁粉吸附法和玻璃吸附法。
1.铁粉吸附法介绍:
铁粉分离法所选用的材料:(1)铁粉或羰基铁粉(Atomergicchemetals)99%的纯度,颗粒小于60μm(GoodfellowMetals)。(2)强磁铁(马蹄形)。(3)一块小棒状磁铁(约1cm长)。(4)毛细吸管等。
操作方法:(1)称取一定量的铁粉,一般为10g,用100ml生理盐水洗涤4次,去除任何可溶性有毒物质。在倒去盐水时,用强磁铁吸住铁粉。
(2)用50ml生理盐水混悬铁粉。摇匀后,分装于10个瓶中,包扎瓶口,121℃灭菌20min,拿出后立即轻轻摇匀,防止铁粉结块,储藏备用。
(3)临用前,倒去瓶中的生理盐水,加入适量的单个核细胞悬液(3ml~5ml,细胞总数为8×107个/瓶)。37℃温育45min,中间不时晃动,使铁粉悬浮起来。
(4)加入一块小磁铁棒于瓶中,让其吸住铁粉以及附着在铁粉上的细胞。
(5)倒出悬液,此悬液主要是淋巴细胞,离心,收集。
(6)在铁粉瓶内倒入一定量的Hank’s液,用力振摇后,以强磁铁吸附,几分钟后,倒出液体。
(7)2000r/min离心液体,管底即为单核细胞。
2.玻璃板吸附法介绍:
将分离的单个核细胞倾于无菌洁净的玻璃平皿内,置37℃30min~40min,用毛细吸管轻轻吸取悬液,即为淋巴细胞。用适量的Hank’s液冲洗平皿,收获即为单核细胞悬液。

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