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连续监测法测定血清丫．谷氨酰基转移酶
连续监测法测定血清丫．谷氨酰基转移酶
关键词：北京标准物质网站 浊度标准物质 农兽药残留 环境检测标准样品
【实验原理】
γ-谷氨酰基转移酶(γ-GT)能催化L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺(GCNA)和双甘肽生成γ-谷氨酰基甘氨酰甘氨酸和2-硝基-5-氨基苯甲酸。碱性条件下2-硝基-5-氨基苯甲酸呈黄色，在405~410nm处监测吸光度增高速率(ΔA／min)，求出γ-GT活性。
【试剂与器材】
底物缓冲液(pH 8．1)：Tris-HCl缓冲液110mmol／L；双甘肽110mmol／L；L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺6．0mmol/L
【操作步骤】
自动化生化分析仪参数设置：反应温度：37℃；延滞时间30秒；连续监测时间60秒；比色杯光径1．0cm；波长405nm；试剂量1000μl；吸样量l00μl；F值1159。
【结果计算】
ALT（U/L）=﹣ΔA／min×(106/9490)×(1.1/1.0)=﹣ΔA／min×1159
式中9490为2-硝基-5-氨基苯甲酸在405nm处的摩尔吸光系数。【参考区间】
男性：1 I~50U／L；女性：7~32U／L。
【临床意义】
1．原发性肝癌时，血清γ-GT活性显著升高，可大于正常指标的几倍到几十倍，而其他系统发生肿瘤时多为正常，特别在诊断患者有无肝转移和肝癌术后有无复发时，阳性率可达90％。
2．胆汁淤积可诱导γ-GT的合成，胆汁可使γ-GT从膜结合部位溶解释出，丫-GT极度升高。其上升程度与血清胆红素、碱性磷酸酶(ALP)一致，但比ALP更敏感，阳性率更高，而且不受骨骼疾病和妊娠的影响。
3．嗜酒者血清γ-GT常升高，酒精性肝炎、酒精性肝硬化者几乎都上升。酒精性中毒患者如不伴有肝病，戒酒后γ-GT迅速下降；如有肝病存在，即使戒酒后γ-GT仍持续升高，
4．接受某些药物如安替比林、苯巴比妥、苯妥英钠等，血清γ-GT活性常升高。
【注意事项】
1．甘氨酸对反应有抑制作用，所用双甘肽制剂中甘氨酸含量应少于0．1％。
2．2-硝基-5-氨基苯甲酸摩尔吸光系数在不同pH、不同温度和不同波长变化较大，在405nm处的摩尔吸光系数为9490，在波长410nm处的摩尔吸光系数为7908，各实验室应自行测定。
3．测定波长选择在405nm，在此波长下羧基底物比非羧基底物有更高的吸光度，而空白吸光度更低。
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