【转帖】鉴定国内HepG2的真实身份

最新回复

• NBA (2015-6-09 16:58:00)

  【二】
  【标准】Hepg2
  1.细胞种类：人肝肿瘤细胞
  2.培养的天数：传代后24小时；
  3.放大倍速：荧光倒置显微镜 X10；
  4.培养基种类：DMEM+10%胎牛血清；
  5.细胞状态与特征简述:细胞呈梭型贴壁生长，图片中的红色圆圈里的梭形细胞都是

  
  61527007.snap.jpg

  
  61068203.snap.jpg

• NBA (2015-6-09 16:59:35)

  【三】
  【原创】HepG2(HCC)
  1.细胞种类：HepG2(人肝癌细胞株)；
  2.培养的天数：2d；
  3.放大倍速：倒置显微镜 X200；
  4.培养基种类：1640+10%胎牛血清；
  5.细胞状态与特征简述:细胞呈梭形或多边形，饱满，贴壁生长

  
  62926687.snap.jpg

  
  99126977.snap.jpg

• NBA (2015-6-09 17:00:05)

  【四】
  我也养过疑似HepG2，细胞形态与【三】最接近，下面是HE染色的图
  在培养过程中，从核酸水平上检测到HBV基因组。故，认定不是HepG2，从而开始漫长的鉴定该细胞株之道路。
  通过查找国内原始文献，另在该网站看到7701的细胞图片，目前觉得是该细胞的可能性最大。
  【原创】QGY-7701细胞
  1.细胞种类：人肝癌细胞株
  2.培养的天数：传代后2d
  3.放大倍速：倒置显微镜 放大倍数：X10
  4.培养基种类：RPMI-1640+10%胎牛血清；
  5.细胞状态与特征简述:细胞贴壁生长，呈梭形或多角型，生长速度快，2d～3d又可传代
  
  虽然此株HBV表达呈阳性，但是QSG-7701是肝癌癌旁组织。
  到底目前国内广为流传的HepG2是哪类细胞？

  
  28717878.snap.jpg

• remonte (2015-6-09 17:01:09)

  
  镜鉴细胞形态可能只是细胞鉴定滴1种形式吧？
  还有其他证据吗？
  你觉得是变异了还是以讹传讹误传了？

• am10 (2015-6-09 17:01:35)

  
  相关疾病：
  肝癌
  应该是误传了，之前有人说是Hela细胞污染了，我们也在养Hela细胞，虽然说Hela细胞跟疑似HepG2很像，但是仔细辨认完全可以区分。当然国内的HepG2种类应该很多，我只是说明我们的情况，如果有兴趣可以检测一下手里的HepG2细胞，HBV是否是阳性。
  前几天，我查到QSG-7701跟我们拿到的HepG2很像，目前没把原文扫描下来。
  QSG-7701:肝癌癌旁组织，HBV，阳性。
  我们的疑似HepG2核酸水平上检测HBV为阳性，而且形态跟7701很相近。如果有办法证明是癌旁组织，应该错不了。
  但是不知道其他种类的HepG2是不是这一种。
  不过：可以肯定的是，没有堆积生长的HepG2,能够清楚看到HepG2形态的细胞一定不是ACTT官方所指的细胞。真正的HepG2细胞很容易堆积，而且HBV检测是阴性。

• am10 (2015-6-09 17:02:27)

  
  以下是QSG-7701和QGY-7703的原始图
  QSG-7701
  
  QGY-7703
  

• shenkunjie (2015-6-09 17:03:11)

  
  最近也在关注这个问题，不知道中科院上海细胞库的HepG2是什么样子的。

• woshi (2015-6-09 17:03:28)

  
  我们实验室的hepg2形态跟三比较类似

• dog002 (2015-6-09 17:10:55)

  单看ATCC的图片和国内HepG2相比，国内这株细胞几乎所有类型都已变异。不论是细胞形态还是生长状态都跟ATCC来源细胞完全是两种不同细胞。但据我看来这株细胞在做细胞实验这一领域无论国内还是国外都可以毫无悬念的位居榜首。对于这样一株来源倍受争议的细胞，目前却是各大实验室的宠儿，希望能提高一下大家的警觉心理，不要因为细胞问题而输在起跑线上。
  另外有个疑问就是这ATCC作为全世界最可信任的细胞库，怎么就不能提供一张清晰一点，细胞状态好一点的图片呢？你看那什么图片！我要看到这图片细胞，早让他见阎王了！

• dior (2015-6-09 17:11:17)

  QUOTE:

  原帖由 dog002 于 2015-6-9 17:10 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  单看ATCC的图片和国内HepG2相比，国内这株细胞几乎所有类型都已变异。不论是细胞形态还是生长状态都跟ATCC来源细胞完全是两种不同细胞。但据我看来这株细胞在做细胞实验这一领域无论国内还是国外都可以毫无悬念的位居 ...

  一个低密度，一个高密度，呵呵，我做实验的时候，老板是从老美那里带回来的细胞，跟ATCC一个样

• S6044 (2015-6-09 17:12:10)

  三和A549也太像了吧
  我们实验室的是从中科院上海细胞库刚买回来的，和上面ATCC的一样，很容易积堆生长。我还以为是我的水平问题，还在愁怎么办

• veiwu (2015-6-09 17:12:49)

  
  好多人关注这个问题啊，不知道大家手中的HepG2成瘤性如何？
  ATCC网站：
  Tumorigenic: No
  为什么有不少文章用G2做裸鼠成瘤实验呢？难道不是真正的G2？

• bring (2015-6-09 17:13:29)

  
  我们实验室就是ATCC里那个德行，是我们这儿最丑的细胞了

• dog002 (2015-6-09 17:13:46)

  
  我现在养的Hep G2跟ATCC那个一个样，在瓶子里一团一团的，根本分不清单个细胞的形态，而且比较郁闷的是，长的很慢，培养好几天了都没长满...

• baidukk (2015-6-09 17:14:34)

  这个得做cytogenetic analysis，才能确定细胞是否正确，靠形态区分不可靠的，基因组分析，不同实验室来源的，有的时候会有微小差异，这是肿瘤细胞基因组不稳定导致的结果，但基本上能判别是否是来源于HepG2的，形态会依不同实验室的培养条件，习惯，基因组不稳定性等因素而不同的。

• ujne (2015-6-09 17:15:51)

  我养的HepG2在10% FBS下很难长，4天都分裂不了几次，消化了还喜欢成团，形态比SMMC 7221难看，不知道是不是正品的啊？

• youyou99 (2015-6-09 17:16:26)

  
  我的细胞也长得巨慢
  上周五从隔壁实验室要来一小瓶，长到周二还很稀，而且成团的，分不清细胞形态，看着跟上面哪一种都不是很像，后来有个师姐跟我说是吹打得不够散，可以重新吹打一次一传一，结果我昨天下午做了一次，今天又长成那样了，而且我经验不足，昨天消化了两次。。。都不知道会不会对细胞造成很大的伤害
  我也是用的DMEM加10%进口FBS，这个细胞到底要怎么样才能长得又快又好呢？

• caihong (2015-6-09 17:17:57)

  请问怎么鉴定HBV啊?提蛋白做ELASA吗？

• dior (2015-6-09 17:18:22)

  我的细胞也长得巨慢
  上周五从隔壁实验室要来一小瓶，长到周二还很稀，而且成团的，分不清细胞形态，看着跟上面哪一种都不是很像，后来有个师姐跟我说是吹打得不够散，可以重新吹打一次一传一，结果我昨天下午做了一次，今天又长成那样了，而且我经验不足，昨天消化了两次。。。都不知道会不会对细胞造成很大的伤害
  我也是用的DMEM加10%进口FBS，这个细胞到底要怎么样才能长得又快又好呢？
  ......
  
  ===============================================================================================================
  
  我养的HepG2和你的情况一样啊，都是一团一团的，分不清单个细胞，并且长了一个多星期了还没有长满，并有部分团块夜色特别亮有点偏黄色，我用的是20%FBS+DMEM，换液时洗涤细胞用的是无血清的培养基，我现在怀疑是不是污染了，但是我也不确定

• xue258 (2015-6-09 17:18:56)

  
  相关疾病：
  我们从上海细胞所买的细胞，外形和描述感觉和ATCC的差不多，但是并没有做进一步的检测，我们同学做过两次成瘤实验，都没有成功，两三个月了，一点点，显然是失败了，现在这个任务落在我头上，想请教一下战友：是否有人做成过HepG2的成瘤实验吗？老鼠品系？还有细胞的浓度是什么？还有肿瘤生长曲线如何？有什么需要特别注意的步骤和窍门吗？